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云淡风轻a

金虫 (小有名气)


[交流] 高手帮忙看一下RNA图,提的头痛啊!

这是用某试剂盒提的,提了三次,基本都这样。

当然我还没有除掉DNA。

这样降解算是比较严重吗?

因为我想做MicroRNA,所以要求比较严格,

希望能提出高质量的来。

中间是DL2000的Maker


希望高手帮我分析一下这图。

这又是一张图

[ Last edited by 云淡风轻a on 2012-8-28 at 12:23 ]
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)


求助中~~
2楼2012-08-28 12:31:05
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happy6

木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不知道你提的是植物组织的还是动物组织的,如果是动物组织的,你可以试一下Qiagen试剂盒,而且提取RNA的时候操作的时候一定要细致,多提几次就会好的。加油!
3楼2012-08-28 12:42:02
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happy6

木虫 (著名写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-28 13:52:03
不知道你提的是植物组织的还是动物组织的,如果是动物组织的,你可以试一下Qiagen试剂盒,而且提取RNA的时候操作的时候一定要细致,多提几次就会好的。加油!
4楼2012-08-28 12:45:09
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by happy6 at 2012-08-28 12:42:02
不知道你提的是植物组织的还是动物组织的,如果是动物组织的,你可以试一下Qiagen试剂盒,而且提取RNA的时候操作的时候一定要细致,多提几次就会好的。加油!

是植物的。
5楼2012-08-28 12:47:41
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huihui1qq

铁虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
什么植物,不同种类型植物用的试剂盒也不一样
6楼2012-08-28 16:45:16
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jjg0912

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
植物的哪个组织的呢?
7楼2012-08-28 20:31:54
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wangfuxiang

铁虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这种图片我以前做实验时也遇见过,好好想想你实验时的细节就行了。。。
8楼2012-08-28 21:27:28
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三叶未央

铜虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
提的RNA有一定的降解,因为有拖尾现象,并且杂带有点多,应该再测下OD值的。
9楼2012-08-29 10:00:37
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by jjg0912 at 2012-08-28 20:31:54
植物的哪个组织的呢?

叶片
10楼2012-08-29 12:53:31
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gwd0312

木虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-30 14:31:29
现在的试剂盒很方便的,有专门针对某种植物的RNA提取试剂盒。你的RNA有降解,可以考虑换一下方法。平时我们都是自己配置溶液,用CTAB法提取的,效果不错!
11楼2012-08-29 12:59:51
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jjg0912

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by 云淡风轻a at 2012-08-29 12:53:31
叶片

那应该是最容易提的啊
12楼2012-08-29 16:25:33
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gjs713

至尊木虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
上海生工的RNA提取试剂盒非常好用,我们提了多次每次效果都很好,可以试试看。还有就是你所有接触的物品都用DEPC泡过么?
13楼2012-08-29 17:02:15
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dayulee

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
降解的比较严重的。一路弥散。上面的条带也不是很大,感觉也不太像DNA污染
14楼2012-08-29 17:13:01
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)


引用回帖:
13楼: Originally posted by gjs713 at 2012-08-29 17:02:15
上海生工的RNA提取试剂盒非常好用,我们提了多次每次效果都很好,可以试试看。还有就是你所有接触的物品都用DEPC泡过么?

东西都死用DEPC泡的,超净台里操作,用氯仿擦了至少两遍
15楼2012-08-29 21:57:10
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)


引用回帖:
14楼: Originally posted by dayulee at 2012-08-29 17:13:01
降解的比较严重的。一路弥散。上面的条带也不是很大,感觉也不太像DNA污染

我感觉得换个试剂盒试试了,其他注意事项都已经想不出了
16楼2012-08-29 21:59:39
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)


引用回帖:
12楼: Originally posted by jjg0912 at 2012-08-29 16:25:33
那应该是最容易提的啊

就是比较奇怪,我这个这么难提,师姐们提烟草轻而易举的。
17楼2012-08-29 22:00:57
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王礼鹏

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
从图中看你的RNA有一定的降解,个人看法还是要多注意细节,比如用的枪头,EP管都要经过灭菌,新开封的,戴上口罩。祝你好运!!!!!
18楼2012-08-30 09:23:46
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longrna

新虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
烟草的RNA易提。
不同植物难易程度差异很大。
Trizol或用试剂盒试试。
第一张图应该不是DNA污染(从Marker判断不像gDNA),第二张图是有明显的DNA污染。
20楼2012-09-08 21:47:52
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)


引用回帖:
20楼: Originally posted by longrna at 2012-09-08 21:47:52
烟草的RNA易提。
不同植物难易程度差异很大。
Trizol或用试剂盒试试。
第一张图应该不是DNA污染(从Marker判断不像gDNA),第二张图是有明显的DNA污染。

我的实验DNA污染没事
21楼2012-09-09 09:08:10
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简单回复
2012-09-08 10:43   回复  
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