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麦子绿豆

银虫 (小有名气)

[求助] 关于挑取单菌落

在做几丁质酶产生菌的筛选试验，具体是：样本涂布到分离培养基中进行培养，产酶的菌会形成透明圈，然后进行挑单菌落分菌。
问题：第一次涂布培养出的平板有明显的透明圈，但是肯定含有杂菌，所以需要挑单菌落。而挑取菌落涂布的平板培养以后，不能产生明显的透明圈，而是在划线的周围形成了透明带，这是为什么呢？以及怎样才能优化挑菌落的方法呢？谢谢！

PS：在挑单菌落时一个板划4个菌落。
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1楼 2012-08-16 11:20:00
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newtime007

木虫 (正式写手)

成长的微生物

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
麦子绿豆: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢！准备稀释再涂一次，应该是浓度太高，后面杂菌就比较多，不好分离。 2012-08-16 15:35:41
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-16 21:14:21
你使用途布分离怎么出现“ 在划线的周围形成了透明带”
把菌液稀释浓度低些，出现较稀少的单菌落比较好。当调取到你认为纯的菌落，进行摇平培养，培养时间控制别太长，然后再稀释涂布分离一次。多做几次吧，总能分到你需要的菌落。
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上善若水，水善利万物而不争
2楼2012-08-16 11:49:41
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42561

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
麦子绿豆: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢！可能是因为浓度太高，导致菌没有分开而在划线周围形成了透明带，适当稀释涂板应该会很好 2012-08-16 15:40:45
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-16 21:14:28
最好一个平板划一个菌落，不知道你是咋划线的，周围还有透明带，分离用的培养基和菌株生长的纯化培养基是不一样的。
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吾爱真理，吾更爱自己
3楼2012-08-16 12:26:04
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daiybe

金虫 (小有名气)

daiybe

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
麦子绿豆: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢！所谓的发酵实验怎样进行呢？目前就是在分离有酶活的单菌落 2012-08-16 15:37:50
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-16 21:14:33
透明圈得大小，与其产的酶量有关系，其产酶量又与菌体数目有关系。单菌落目标菌数量比划线的要集中一些，因此明显，另外，你可进行发酵试验，挑取单菌落进行摇瓶发酵试验是最直接、最有效的方法
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爱一个人，比恨一个人难的太多了
4楼2012-08-16 13:11:43
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bjck2008

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
麦子绿豆: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2012-08-16 15:39:07
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-16 21:14:39
稀释涂板要比划线分到的单菌落好一些，有时候划线可能会导致几个菌落重叠在一起，稀释成一个板长十几个的浓度分出来的会很纯的。
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5楼2012-08-16 13:49:23
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zhangyijia

铜虫 (小有名气)
为什么一个板划四个菌落？这样吧更乱了吗。
我觉得稀释涂布更合适一点，长出透明带是不是因为菌落连在一起了？我做糖化酶产生菌筛选的时候也看到过。
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不凡不简，不乱不换
6楼2012-08-17 20:19:51
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woshizhufeng

新虫 (小有名气)
多转几次吧
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7楼2012-08-17 23:24:52
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