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麦子绿豆

银虫 (小有名气)

[求助] 关于挑取单菌落

在做几丁质酶产生菌的筛选试验,具体是:样本涂布到分离培养基中进行培养,产酶的菌会形成透明圈,然后进行挑单菌落分菌。
问题:第一次涂布培养出的平板有明显的透明圈,但是肯定含有杂菌,所以需要挑单菌落。而挑取菌落涂布的平板培养以后,不能产生明显的透明圈,而是在划线的周围形成了透明带,这是为什么呢?以及怎样才能优化挑菌落的方法呢?谢谢!

PS:在挑单菌落时一个板划4个菌落。
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42561

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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麦子绿豆: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢!可能是因为浓度太高,导致菌没有分开而在划线周围形成了透明带,适当稀释涂板应该会很好 2012-08-16 15:40:45
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-16 21:14:28
最好一个平板划一个菌落,不知道你是咋划线的,周围还有透明带,分离用的培养基和菌株生长的纯化培养基是不一样的。
吾爱真理,吾更爱自己
3楼2012-08-16 12:26:04
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newtime007

木虫 (正式写手)

成长的微生物

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
麦子绿豆: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢!准备稀释再涂一次,应该是浓度太高,后面杂菌就比较多,不好分离。 2012-08-16 15:35:41
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-16 21:14:21
你使用途布分离怎么出现“ 在划线的周围形成了透明带”
把菌液稀释浓度低些,出现较稀少的单菌落比较好。当调取到你认为纯的菌落,进行摇平培养,培养时间控制别太长,然后再稀释涂布分离一次。多做几次吧,总能分到你需要的菌落。
上善若水,水善利万物而不争
2楼2012-08-16 11:49:41
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daiybe

金虫 (小有名气)

daiybe

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
麦子绿豆: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢!所谓的发酵实验怎样进行呢?目前就是在分离有酶活的单菌落 2012-08-16 15:37:50
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-16 21:14:33
透明圈得大小,与其产的酶量有关系,其产酶量又与菌体数目有关系。单菌落目标菌数量比划线的要集中一些,因此明显,另外,你可进行发酵试验,挑取单菌落进行摇瓶发酵试验是最直接、最有效的方法
爱一个人,比恨一个人难的太多了
4楼2012-08-16 13:11:43
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bjck2008

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
麦子绿豆: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢! 2012-08-16 15:39:07
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-16 21:14:39
稀释涂板要比划线分到的单菌落好一些,有时候划线可能会导致几个菌落重叠在一起,稀释成一个板长十几个的浓度分出来的会很纯的。
5楼2012-08-16 13:49:23
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