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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 糖代谢 酶活试剂盒
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jiangpeace

铁虫 (小有名气)

[求助] 糖代谢 酶活试剂盒

我做鱼类糖代谢，大致有葡糖激酶(GK)、己糖激酶(HK)、葡萄糖脱氢酶(GDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)及丙酮酸激酶(PK）这几种酶，文献中好像都是自己配试剂测的，不知道是不是需要买试剂盒，一般用南京建成的比较多好像。如何选择用哪几种酶？
“上述测定结果用己糖激酶(HK, EC: 2·7·1·1)和葡萄糖脱氢酶(GDH, EC: 1·1·1·47)校正后的值为GK活性。”文献中都是这句话，不明白什么意思，还有括号里是什么意思？
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1楼 2012-08-14 12:44:27
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jiangpeace

铁虫 (小有名气)
大家帮忙啊，如何校正呢？
文献中的“将上法中ATP去除所测值为葡萄糖脱氢酶活性”又是什么意思？
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2楼2012-08-17 09:43:36
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
帮你回答一部分问题
括号中，字母是酶的缩写，EC什么的是酶学委员会（Enzyme Commission）为酶所制作的一套编号分类法。
关于方法中其他你不明白的内容，最好把文献方法全部贴出来，大家可以帮你分析
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
3楼2012-08-17 11:07:52
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jiangpeace

铁虫 (小有名气)
GK活性测定参照Tranul15，蔡春芳，蒋传葵，高学军等的方法(Tranul15MA
etal，1996;蔡春芳，2004:蒋传葵等，1982;高学军等，2004)，反应体系为:......。【上述测定结果以己糖激酶(HK)和葡萄糖脱氢酶(GDH)校正后的值为葡萄糖激酶(GK)活性值】。上法中葡萄糖水平改为0.5mM时所测值为己糖激酶(HK)值; 【上法中ATP去除所测值为葡萄糖脱氢酶(GDH)活性值】。各试管中分别加入lml反应液，在25℃恒温水浴中保温3min以上，待温度稳定后分别加入40ul酶液(空白管不加酶液)，.....
请问上述【 】中的是什么意思？
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4楼2012-08-18 14:59:42
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nieqin138220

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
jiangpeace: 金币+2, ★有帮助 2012-08-22 10:39:33
建议你看这篇文献，可以解决你的疑问为何要用GDH校正：《A Glucokinase-Like Enzyme in the Liver of Atlantic Salmon (Salmo Salar) 》，Michael A. Tranulis
（1）体系加100mM葡萄糖和ATP时，所测的活力值为总HK（包括I,II,III,IV）和GDH的活力值，（2）体系加0.5mM葡萄糖和ATP时，所测的值为HK（包括I,II,III）的活力值——GK（HK IV）对葡萄糖Km值高，此时不反应，（3）体系加100mM葡萄糖和不加ATP时，所测为GDH的活力值。
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不抛弃理想，不放弃努力
5楼2012-08-20 15:51:42
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北国流浪情人

银虫 (小有名气)
我最近在做金鱼糖代谢相关酶活的检测，但相关试剂的配制及用量都还没有查好，不知道您有没有总结相关的试验方法和相关试剂配制及用量的记录，如果有的话，可不可以传授一下经验，万分感谢
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6楼2014-04-23 21:30:53
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