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ringray

木虫 (正式写手)

[求助] 谁有苹果糖代谢相关酶活测定的具体方法

6-磷酸醛糖还原酶(Aldose-6-phosphate reductase, A6PR) 山梨醇脱氢酶SDH  磷酸蔗糖合成酶(Sucrose phosphate synthase,SPS) 蔗糖合成酶(Sucrose synthase,SS) 酸性转化酶(Acid invertase,AI) 淀粉酶活性(Amylase)

文献上都是笼统的,不严谨 给个详细的不要粘贴.
给个详细的 尤其反应体系的问题 该反应体系包括:0.1mmol•L-1 NADPH,0.1 mol•L-1 Tris-HCL(pH8.5),50mmol•L-1 G6P和0.lml酶液 前面怎么配,分别匹配的话加上后浓度就变了,一起配吗,搞不懂咋配 咋加
还有酶活的单位两种类型 比如SDH酶  μmolNADH h-1 g-1 Fw 和 μmolNADH mg-1 protein h-1 啥意思 能转化吗
在这先感谢一下
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Tracyhhy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
具体的实验方法最靠谱的还是去找植物生理学实验指导之类的书籍
文献上都是比较简略的

μmolNADH h-1 g-1 Fw 和 μmolNADH mg-1 protein h-1

这两个是可以转化的
你通过测定蛋白质含量,就可以把前面转化成后面的那个
2楼2012-09-13 18:59:55
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ringray

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Tracyhhy at 2012-09-13 18:59:55
具体的实验方法最靠谱的还是去找植物生理学实验指导之类的书籍
文献上都是比较简略的

μmolNADH h-1 g-1 Fw 和 μmolNADH mg-1 protein h-1

这两个是可以转化的
你通过测定蛋白质含量,就可以把前面转化成后 ...

这些方法 植物生理上是没有的
3楼2012-09-15 16:19:39
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Tracyhhy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by ringray at 2012-09-15 16:19:39
这些方法 植物生理上是没有的...

我记得有本果实品质分析之类的书(好象是浙大陈昆松等人编写的),里面有一些果实代谢酶的方法
如果书上没有的话,只能自己摸索了,那些浓度都是终浓度,前面先配母液,然后按照比例加进去就可以了
一般来说NADH之类的都是启动反应了,往往是最后加
4楼2012-09-15 18:26:55
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ringray

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Tracyhhy at 2012-09-15 18:26:55
我记得有本果实品质分析之类的书(好象是浙大陈昆松等人编写的),里面有一些果实代谢酶的方法
如果书上没有的话,只能自己摸索了,那些浓度都是终浓度,前面先配母液,然后按照比例加进去就可以了
一般来说NADH ...

文献上都是终浓度,没有母液的配法
5楼2012-09-18 22:03:10
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ringray

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Tracyhhy at 2012-09-15 18:26:55
我记得有本果实品质分析之类的书(好象是浙大陈昆松等人编写的),里面有一些果实代谢酶的方法
如果书上没有的话,只能自己摸索了,那些浓度都是终浓度,前面先配母液,然后按照比例加进去就可以了
一般来说NADH ...

母液不知咋配
6楼2012-09-18 22:06:35
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Tracyhhy

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ringray at 2012-09-18 22:03:10
文献上都是终浓度,没有母液的配法...

一般都是整数倍的浓度吧,20倍、30倍差不多了
很好计算啊
7楼2012-09-19 10:45:32
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ringray

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Tracyhhy at 2012-09-19 10:45:32
一般都是整数倍的浓度吧,20倍、30倍差不多了
很好计算啊...

谢谢你这么有耐心 如我问题中的反应体系如果是1ml的反应体系,按上面的各成分浓度,怎么配?
8楼2012-09-20 09:50:19
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Tracyhhy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果要配置1ml 的体系的话:0.1mmol•L-1 NADPH,0.1 mol•L-1 Tris-HCL(pH8.5),50mmol•L-1 G6P和0.lml酶液
可以这么配:Tris-HCl  (0.125M)0.8 ml
                  酶液0.1 ml
                 NADPH(2 mM )  50 ul
                 G6P    (1M)       50 ul
9楼2012-09-20 11:29:48
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taojia7560

木虫 (正式写手)

请问楼主现在有没有这些糖代谢酶的测定方法?我马上也要准备测这些酶活性,可不可以传授点经验。谢谢!
平凡
10楼2013-12-04 22:31:29
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