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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 园艺 » 谁有苹果糖代谢相关酶活测定的具体方法
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ringray

木虫 (正式写手)

[求助] 谁有苹果糖代谢相关酶活测定的具体方法

6-磷酸醛糖还原酶（Aldose-6-phosphate reductase, A6PR） 山梨醇脱氢酶SDH  磷酸蔗糖合成酶（Sucrose phosphate synthase，SPS） 蔗糖合成酶（Sucrose synthase，SS） 酸性转化酶（Acid invertase，AI） 淀粉酶活性（Amylase）

文献上都是笼统的,不严谨 给个详细的不要粘贴.
给个详细的 尤其反应体系的问题 该反应体系包括：0.1mmol•L-1 NADPH，0.1 mol•L-1 Tris-HCL（pH8.5），50mmol•L-1 G6P和0.lml酶液 前面怎么配,分别匹配的话加上后浓度就变了,一起配吗,搞不懂咋配 咋加
还有酶活的单位两种类型 比如SDH酶  μmolNADH h-1 g-1 Fw 和 μmolNADH mg-1 protein h-1 啥意思 能转化吗
在这先感谢一下
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1楼 2012-09-11 22:17:05
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Tracyhhy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
具体的实验方法最靠谱的还是去找植物生理学实验指导之类的书籍
文献上都是比较简略的

μmolNADH h-1 g-1 Fw 和 μmolNADH mg-1 protein h-1

这两个是可以转化的
你通过测定蛋白质含量，就可以把前面转化成后面的那个
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2楼2012-09-13 18:59:55
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ringray

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Tracyhhy at 2012-09-13 18:59:55
具体的实验方法最靠谱的还是去找植物生理学实验指导之类的书籍
文献上都是比较简略的

μmolNADH h-1 g-1 Fw 和 μmolNADH mg-1 protein h-1

这两个是可以转化的
你通过测定蛋白质含量，就可以把前面转化成后 ...

这些方法 植物生理上是没有的
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3楼2012-09-15 16:19:39
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Tracyhhy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by ringray at 2012-09-15 16:19:39
这些方法 植物生理上是没有的...

我记得有本果实品质分析之类的书（好象是浙大陈昆松等人编写的），里面有一些果实代谢酶的方法
如果书上没有的话，只能自己摸索了，那些浓度都是终浓度，前面先配母液，然后按照比例加进去就可以了
一般来说NADH之类的都是启动反应了，往往是最后加
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4楼2012-09-15 18:26:55
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ringray

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Tracyhhy at 2012-09-15 18:26:55
我记得有本果实品质分析之类的书（好象是浙大陈昆松等人编写的），里面有一些果实代谢酶的方法
如果书上没有的话，只能自己摸索了，那些浓度都是终浓度，前面先配母液，然后按照比例加进去就可以了
一般来说NADH ...

文献上都是终浓度,没有母液的配法
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5楼2012-09-18 22:03:10
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ringray

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Tracyhhy at 2012-09-15 18:26:55
我记得有本果实品质分析之类的书（好象是浙大陈昆松等人编写的），里面有一些果实代谢酶的方法
如果书上没有的话，只能自己摸索了，那些浓度都是终浓度，前面先配母液，然后按照比例加进去就可以了
一般来说NADH ...

母液不知咋配
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6楼2012-09-18 22:06:35
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Tracyhhy

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ringray at 2012-09-18 22:03:10
文献上都是终浓度,没有母液的配法...

一般都是整数倍的浓度吧，20倍、30倍差不多了
很好计算啊
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7楼2012-09-19 10:45:32
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ringray

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Tracyhhy at 2012-09-19 10:45:32
一般都是整数倍的浓度吧，20倍、30倍差不多了
很好计算啊...

谢谢你这么有耐心 如我问题中的反应体系如果是1ml的反应体系,按上面的各成分浓度,怎么配?
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8楼2012-09-20 09:50:19
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Tracyhhy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果要配置1ml 的体系的话：0.1mmol•L-1 NADPH，0.1 mol•L-1 Tris-HCL（pH8.5），50mmol•L-1 G6P和0.lml酶液
可以这么配：Tris-HCl  （0.125M）0.8 ml
                  酶液0.1 ml
                 NADPH（2 mM ）  50 ul
                 G6P    （1M）       50 ul
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9楼2012-09-20 11:29:48
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taojia7560

木虫 (正式写手)
请问楼主现在有没有这些糖代谢酶的测定方法？我马上也要准备测这些酶活性，可不可以传授点经验。谢谢！
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平凡
10楼2013-12-04 22:31:29
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