应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 噬菌体滴度测定
61/1返回列表
查看: 6052  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

cathystar

铁虫 (初入文坛)

[求助] 噬菌体滴度测定 已有1人参与

我重复两次测了噬菌体滴度，我放置室温过夜培养，第二天去看噬菌斑长得大小不一，我不知道如何计数，
如下图所示
我倒的顶层培养基可能有的凝固了，所以长成这样了，
噬菌斑长成这样还能计数吗，我做了两次了，每次倒的时候多少都有凝固的现象，
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

噬菌体展示

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-10 20:07:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

876374799

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

长成这样计数就不太准确，Top-agar溶化后必须保温在45-50 摄氏度，十分钟之内操作完。若十分钟不能操作完，可先保温在80摄氏度，用时再降温。另外平板必须在37摄氏度预热1h。
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-25 13:22:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郑海宏

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

倒板儿之前，上层一定里面有琼脂颗粒了吧
赞一下 回复此楼
3楼2014-11-15 17:12:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rmbszla

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 876374799 at 2013-06-25 13:22:45
长成这样计数就不太准确，Top-agar溶化后必须保温在45-50 摄氏度，十分钟之内操作完。若十分钟不能操作完，可先保温在80摄氏度，用时再降温。另外平板必须在37摄氏度预热1h。

想问一下，平板为什么要在37度预热呢？怎么进行这个操作
赞一下 回复此楼
4楼2015-05-23 10:46:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

砰砰响

新虫 (初入文坛)
楼主您好

我刚开始做噬菌体展示，测定辅助噬菌体KM13滴度，始终没有长噬菌斑，您确定是您这样的吗？

测定辅助噬菌体KM13滴度，实验室保存的，辅助噬菌体是感染50ml TG1（菌株无抗性）后扩增。

1、取扩增后的M13K07原液2xYT培养基100倍10000倍和10^10稀释。
2、稀释后KM13 10μL与200μLTG1菌液混合（菌液已经增长到OD600=1），37℃孵育1h，
3、之后与4mL 0.5% Top Agar（42℃孵育的）混匀，倾注于2×YT（无抗性）平板｛已经37℃预热｝，凝固后置于37℃恒温培养。

始终没有长噬菌斑。我我检查过平板、顶层琼脂都是新配制的。KM13是感染50mlTG1菌扩增后的，请您指导下，
我都做了一星期了。现在还不知道社么原因？！！
赞一下 回复此楼
5楼2017-06-30 17:26:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈小默kai

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 砰砰响 at 2017-06-30 17:26:07
楼主您好

我刚开始做噬菌体展示，测定辅助噬菌体KM13滴度，始终没有长噬菌斑，您确定是您这样的吗？

测定辅助噬菌体KM13滴度，实验室保存的，辅助噬菌体是感染50ml TG1（菌株无抗性）后扩增。

1、取扩增后 ...

我记得我做的时候的TG1菌液的OD600=0.4-0.6之间，应该是感染对数期的TG1菌。还有就是可能你的原液本身滴度或菌活性就不是很好，可以直接拿原液试试。
赞一下 回复此楼
开心过好每一天
6楼2018-11-19 11:01:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cathystar 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭