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lzdx

木虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
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虫号: 830759

[交流] HPLC问题，求助

样品用90%ACN+10%H2O冲很久都冲不出峰，90%甲醇+水也不出峰，用纯甲醇很快就能冲出来，按理乙腈的洗脱能力不是比甲醇强吗，会什么会这样

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1楼 2012-08-09 15:25:28

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wy511813

银虫 (小有名气)

应助: 43 (小学生)
金币: 308
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虫号: 1193622

★
lzdx(金币+1): 谢谢参与

根据分析物，确定色谱条件和色谱柱类型。需要摸索的无非是有机相种类，两相比例，pH，离子强度。参阅相关文献，再加上你的耐心，肯定可以搞定的！

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7楼2012-08-10 08:28:16

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wonder2002

金虫 (正式写手)

应助: 30 (小学生)
金币: 632
帖子: 310
在线: 45.1小时
虫号: 262863

★ ★
lzdx(金币+1): 谢谢参与
408851978: 金币+1 2012-08-09 21:16:52

两者的洗脱能力差不多，还是有点区别的。请查看《实用高效液相色谱方法建立》第253页，有甲醇，乙腈的对比。如果你90%甲醇冲很长时间不出峰，用纯甲醇冲不可能很快就出来的，怀疑是溶剂峰。如果是90%甲醇冲洗时间很长，而纯甲醇出峰快是合理的，因为出峰时间跟有机相的洗脱体积有直接关系。
建议加入5%的异丙醇试试。保留较强的可以尝试使用不同浓度的异丙醇冲洗，如果还不行，建议使用非水反相模式。

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2楼2012-08-09 20:08:12

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