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lzdx

木虫 (正式写手)

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虫号: 830759

[交流] HPLC问题，求助

样品用90%ACN+10%H2O冲很久都冲不出峰，90%甲醇+水也不出峰，用纯甲醇很快就能冲出来，按理乙腈的洗脱能力不是比甲醇强吗，会什么会这样

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1楼 2012-08-09 15:25:28

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ahlajs

金虫 (小有名气)

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★
lzdx(金币+1): 谢谢参与

这种情况真的很少碰到，纯甲醇冲洗的时候色谱峰什么时候出来？
另外，楼主可以尝试一下95%甲醇的洗脱能力，根据实验结果再分析原因。

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4楼2012-08-09 21:37:34

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wonder2002

金虫 (正式写手)

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★ ★
lzdx(金币+1): 谢谢参与
408851978: 金币+1 2012-08-09 21:16:52

两者的洗脱能力差不多，还是有点区别的。请查看《实用高效液相色谱方法建立》第253页，有甲醇，乙腈的对比。如果你90%甲醇冲很长时间不出峰，用纯甲醇冲不可能很快就出来的，怀疑是溶剂峰。如果是90%甲醇冲洗时间很长，而纯甲醇出峰快是合理的，因为出峰时间跟有机相的洗脱体积有直接关系。
建议加入5%的异丙醇试试。保留较强的可以尝试使用不同浓度的异丙醇冲洗，如果还不行，建议使用非水反相模式。

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2楼2012-08-09 20:08:12

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