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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】关于HPLC问题
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swallow675

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于HPLC问题

求教：我做的是环境污染物的体外代谢，现在用高效检测代谢产物。我用的流动相是：乙腈和0.1%的甲酸缓冲液。我的代谢体系中有SOD和NADPH，HRP等酶，还有Tris-HCl buffer .只经过了离心处理，没有其他的样品前处理，在HPLC中，底物和代谢产物的保留时间差了很多，不知道是什么原因。希望大家帮帮忙？或则有人遇到过类似的情况没啊？你们的缓冲液还有酶是怎么进行后处理的啊 ，感激！！！
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1楼 2010-12-08 10:45:13
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cpuyxj

金虫 (正式写手)
swallow675(金币+1): 2011-03-11 17:07:05
swallow675(金币+1): 2011-06-13 20:12:58
底物和代谢产物差很多有什么问题吗？不就应该有差异吗？
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2楼2011-01-03 11:15:55
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swallow675

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cpuyxj at 2011-01-03 11:15:55:
底物和代谢产物差很多有什么问题吗？不就应该有差异吗？

哦  可能是我没说清楚  我的意思是说我的底物单独跑的时候和底物在代谢体系中的保留时间差很多
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3楼2011-03-10 11:06:58
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shyron

木虫 (正式写手)
swallow675(金币+1): 2011-03-11 17:06:54
swallow675(金币+1): 2011-06-13 20:13:08
如果色谱条件一样，那你的底物可能就不存在了，全部代谢掉也是可能的。可以在代谢底物样品中人为加入底物，看这个峰有没有出现，来判断是不是代谢完全了。
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4楼2011-03-10 13:38:47
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swallow675

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by shyron at 2011-03-10 13:38:47:
如果色谱条件一样，那你的底物可能就不存在了，全部代谢掉也是可能的。可以在代谢底物样品中人为加入底物，看这个峰有没有出现，来判断是不是代谢完全了。

人为加入底物后   单独的底物和代谢体系中的底物保留时间有很大的差别
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5楼2011-03-11 17:06:21
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shyron

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by swallow675 at 2011-03-11 17:06:21:
人为加入底物后   单独的底物和代谢体系中的底物保留时间有很大的差别

是不是可以这样理解？从液相色谱的角度来说，你说的代谢后的底物和原来的底物不是同一个东西了。
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6楼2011-03-11 20:10:15
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云林影

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
用梯度洗脱试一下啊
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7楼2011-05-16 16:37:11
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swallow675

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 云林影 at 2011-05-16 16:37:11:
用梯度洗脱试一下啊

我就是梯度洗脱来的哈
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8楼2011-05-18 17:22:17
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筑梦之旅

金虫 (正式写手)
再用梯度洗脱重新试一下
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9楼2011-06-13 20:08:29
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