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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】关于HPLC问题
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swallow675

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于HPLC问题

求教：我做的是环境污染物的体外代谢，现在用高效检测代谢产物。我用的流动相是：乙腈和0.1%的甲酸缓冲液。我的代谢体系中有SOD和NADPH，HRP等酶，还有Tris-HCl buffer .只经过了离心处理，没有其他的样品前处理，在HPLC中，底物和代谢产物的保留时间差了很多，不知道是什么原因。希望大家帮帮忙？或则有人遇到过类似的情况没啊？你们的缓冲液还有酶是怎么进行后处理的啊 ，感激！！！
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1楼 2010-12-08 10:45:13
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shyron

木虫 (正式写手)
swallow675(金币+1): 2011-03-11 17:06:54
swallow675(金币+1): 2011-06-13 20:13:08
如果色谱条件一样，那你的底物可能就不存在了，全部代谢掉也是可能的。可以在代谢底物样品中人为加入底物，看这个峰有没有出现，来判断是不是代谢完全了。
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4楼2011-03-10 13:38:47
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shyron

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by swallow675 at 2011-03-11 17:06:21:
人为加入底物后   单独的底物和代谢体系中的底物保留时间有很大的差别

是不是可以这样理解？从液相色谱的角度来说，你说的代谢后的底物和原来的底物不是同一个东西了。
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6楼2011-03-11 20:10:15
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