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液相分离两个生物碱，分不开啊！
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| 用液相分两个生物碱，一个是可可碱，一个是利血平，两个分完全重叠，用甲醇：水（0.05%冰醋酸）=10:90流动相，我是刚刚开始做实验，希望大家多多指教！ |
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lzjessie_wlf
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【答案】应助回帖
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soundhorizo: 金币+3 2012-08-09 12:47:30
soundhorizo: ACI+1, 应助辛苦 ^^ 2012-08-10 00:00:58
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reserpine: 弱碱性物质 Column : ODS column 2.0mm I.D. x 50 mmL Mobile phase A : 5mmol/L ammonium formate - water Mobile phase B : acetonitrile Gradient program : 20%B (0 min) 80%B (15 min) Flow rate : 0.2 mL/min Injection volume : 1 uL Column temperature : 40 deg. C 出峰时间大概为 12.25 min Theobromide， 碱性物质 在弱碱性条件下 Zorbax Eclipse XDB-C8 column (4.6 150 mm i.d., 5-μm particle size) at 25°C, with a mobile phase of water–THF (0.1% THF in water, pH 8)–acetonitrile (90:10, v/v). The flow rate is 0.8 mL/min, and detection is by UV at 273 nm retention time of theobromide 3.25 min 1 1-methylxanthine 2 1,3-dimethyluric acid 3 3,7-dimethylxanthine theobromide 4 1,7-dimethylxanthine Column: ZORBAX SB-C18 (4.6X250, 5uM, rentention time 4.9 min) Mobile phase: A = 0.2% FA B = AcCN w 0.2% FA Isocratic composition: 98% A 2% B (v/v) Flow rate: 1.5 mL/min Injection volume: 2, 4, 6 μL, respectively Detector: DAD, 254 nm Flowcell: 3 μL, 2-mm flow path 希望这些条件可以帮助到你 |
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hytlovelm10楼2012-08-09 05:25:34
【答案】应助回帖
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hytlovelm: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2012-08-08 23:51:43
soundhorizo: 金币+3, 感谢应助 ^^ 欢迎常来分析版 2012-08-09 00:08:30
408851978: 金币+1 2012-08-09 21:20:57
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408851978: 金币+1 2012-08-09 21:20:57
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结构差异还挺大的，应该很容易分开的。是用来分析还是制备？ 用你现在的流动相调，只是调梯度，基本上是没什么希望了，试试看换不同的流动相，如加TFA，THF，TEA等，另外，做碱性化合物最好不要用甲醇，峰形不好，尤其是酸性和近中性条件下。 如果有耐碱的柱子，如XBridgeC18,可以尝试碱性条件下分离，分离度和峰形都会有很大的改善。 如果想在酸性条件下做，又不想加特别复杂的添加剂，条件允许的话，可以试试一些特色柱，国内的有些特色柱做的还不错的，有个好像叫华谱的有这些柱子（我跟这公司没关系，不带推销，只是用了一两根，感觉还不错） |
7楼2012-08-08 20:52:35
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