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hytlovelm

银虫 (正式写手)

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[求助] 液相分离两个生物碱，分不开啊！

用液相分两个生物碱，一个是可可碱，一个是利血平，两个分完全重叠，用甲醇：水（0.05%冰醋酸）=10:90流动相，我是刚刚开始做实验，希望大家多多指教！

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1楼 2012-08-08 16:22:21

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lzjessie_wlf

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
soundhorizo: 金币+3 2012-08-09 12:47:30
soundhorizo: ACI+1, 应助辛苦 ^^ 2012-08-10 00:00:58

reserpine: 弱碱性物质
Column : ODS column 2.0mm I.D. x 50 mmL
Mobile phase A : 5mmol/L ammonium formate - water
Mobile phase B : acetonitrile
Gradient program : 20%B (0 min) 80%B (15 min)
Flow rate : 0.2 mL/min
Injection volume : 1 uL
Column temperature : 40 deg. C
  出峰时间大概为 12.25 min

Theobromide，碱性物质
在弱碱性条件下
Zorbax Eclipse XDB-C8 column (4.6 150 mm i.d.,
5-μm particle size) at 25°C, with a mobile phase of water–THF
(0.1% THF in water, pH 8)–acetonitrile (90:10, v/v). The flow rate
is 0.8 mL/min, and detection is by UV at 273 nm  retention time of theobromide 3.25 min

1 1-methylxanthine
2 1,3-dimethyluric acid
3 3,7-dimethylxanthine theobromide
4 1,7-dimethylxanthine
Column:  ZORBAX SB-C18 (4.6X250, 5uM, rentention time 4.9 min)
Mobile phase: A = 0.2% FA
B = AcCN w 0.2% FA
Isocratic composition:  98% A 2% B (v/v)
Flow rate: 1.5 mL/min
Injection volume: 2, 4, 6 μL, respectively
Detector: DAD, 254 nm
Flowcell: 3 μL, 2-mm flow path

希望这些条件可以帮助到你