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lmcyjxs金虫 (正式写手)
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[求助]
急，请大家帮帮忙，可以室温沉淀RNA吗？
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问题如题，我前天用CTAB法提RNA，抽提溶液自制，LiCL沉淀RNA -20℃冰箱沉淀4小时后无沉淀，我觉得是失败了（其实也可能没，只是当时我不知道RNA是无色胶状的沉淀，以为是肉眼清晰可见的白色沉淀，查了资料才知道可能是这样的）就想不要了，后放于室温，过了两天，发现有白色絮状沉淀了，先又放回了-20℃冰箱冻着。 现在我想问，这些可能是RNA吗？RNA的沉淀都是无色胶状的吗？ 请各位高手指点，小妹初次接触这行，已经提过两次了，都是一样的情况，心里面好失落啊！眼看整个暑假就差不多过去了，俺还不能回家，没做成绩出来的话，还怎么混啊  |
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lmcyjxs: 回帖置顶 2012-08-08 10:32:46
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能否继续请教一下一些细节问题？ 1、溶液的配制，用于提RNA的tris溶液你是用DEPC灭菌水配的吗？还是直接去离子水配的？这些用来装各溶液的瓶子你有没有用DEPC水浸泡过？ 2、那些tips和离心管我只用了高压高温灭菌，没有用DEPC水浸泡过，这样会很影响实验吗？你在做实验的时候有用DEPC水泡过吗？ 3、配制CTAB-tris溶液时，里面一些试剂的添加入顺序有影响吗？ 4、你看到的RNA沉淀是什么样的呢？不是无色透明的胶状沉淀吗？ 5、提RNA的时候，你觉得最关键的步骤在于哪里？ 我初次接触这些，提过3次了，都感觉看不到沉淀，也不知道是不是试剂的问题，还是操作的问题。。。对于以上问题，很希望可以交流交流！谢谢啦 |
4楼2012-08-07 22:48:29
