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[交流]
乳酸菌的分离与鉴定
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大家好 小虫第一次分离乳酸菌 出现了很多问题 想找有经验的虫虫交流讨论下。 1、在分离的过程中就发现问题，我是从动物肠道中分离乳酸菌的，所以对肠道内容物进行了逐级稀释后涂板（MRS固体培养基）厌氧培养，但是结果发没有稀释的长出来了，但是稀释10的4、5和6次方的都是一个都没长，很是迷茫，不知道原因是什么？ 2、对长出来的菌落进行液体培养基扩增培养，培养12个小时左右就会发现试管底部有很多白色沉淀，请问这些白色沉淀是乳酸菌嘛（我挑取的每个菌落进行扩增培养试管底部都有白色沉淀）？ 3、进行革兰氏染色效果总不是太好，做了很多次效果都是不是很好，染出来总是比较兰。 4、下一步准备做抗逆性，但是要对细菌进行定量，准备采用血细胞计数板，但是好像不准，不知道用什么其他方法合适？ 如果有那个虫虫懂的，请不吝赐教，万分感谢！  MRS培养基上分离的乳酸菌 [ Last edited by 小小佐罗2 on 2012-8-1 at 13:01 ] |
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9楼2012-08-02 09:56:34
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小小佐罗2: 金币+1, 谢谢 2012-08-02 11:16:41
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小小佐罗2: 金币+1, 谢谢 2012-08-02 11:16:41
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1、稀释的没长，很可能是在稀释的过程中没充分混匀，再就是所取的肠段（取得哪部分肠段啊）可能含乳酸菌较少；从你的培养皿上看，如果培养基里面含碳酸钙的话，应该是乳酸菌（有溶钙圈）。 2、针对白色沉淀，可以取液体在平皿上划线分离看看； 3、不知道你所说的染色效果不好是什么情况，能否具体告知？ 4、至于定量吗，普遍使用的是平板计数，可以取一定量的菌液接种到一定量的液体培养基中进行培养，然后进行平板计数，记出数来，然后按计数时的培养方法进行再培养（定菌液、定培养基量、同温度、同时间）。 [ Last edited by weiyasong on 2012-8-2 at 10:54 ] |
10楼2012-08-02 10:47:49
3楼2012-08-01 15:44:16
4楼2012-08-01 16:05:05
★
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5楼2012-08-01 16:15:26
6楼2012-08-01 18:02:54
7楼2012-08-01 18:03:09
8楼2012-08-01 18:04:31
11楼2012-08-03 15:25:55
12楼2012-08-03 16:52:58
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