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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 乳酸菌的分离与鉴定
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小小佐罗2

木虫 (正式写手)

[交流] 乳酸菌的分离与鉴定

大家好 小虫第一次分离乳酸菌 出现了很多问题 想找有经验的虫虫交流讨论下。
1、在分离的过程中就发现问题，我是从动物肠道中分离乳酸菌的，所以对肠道内容物进行了逐级稀释后涂板（MRS固体培养基）厌氧培养，但是结果发没有稀释的长出来了，但是稀释10的4、5和6次方的都是一个都没长，很是迷茫，不知道原因是什么？
2、对长出来的菌落进行液体培养基扩增培养，培养12个小时左右就会发现试管底部有很多白色沉淀，请问这些白色沉淀是乳酸菌嘛（我挑取的每个菌落进行扩增培养试管底部都有白色沉淀）？
3、进行革兰氏染色效果总不是太好，做了很多次效果都是不是很好，染出来总是比较兰。
4、下一步准备做抗逆性，但是要对细菌进行定量，准备采用血细胞计数板，但是好像不准，不知道用什么其他方法合适？
  如果有那个虫虫懂的，请不吝赐教，万分感谢！

MRS培养基上分离的乳酸菌



[ Last edited by 小小佐罗2 on 2012-8-1 at 13:01 ]
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1楼2012-08-01 12:52:24
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小小佐罗2

木虫 (正式写手)
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3楼: Originally posted by eagles123 at 2012-08-01 15:44:16
你用啥稀释的

灭菌水
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6楼2012-08-01 18:02:54
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小小佐罗2

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by guhousheng at 2012-08-01 16:05:05
进行镜检及其他简单的理化实验鉴定嘛

还没
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7楼2012-08-01 18:03:09
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小小佐罗2

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wangxm413 at 2012-08-01 16:15:26
MRS培养基中加碳酸钙，乳酸菌菌落周围会有明显的透明圈。液体培养时，乳酸菌易形成沉淀，GRAM染色阳性无芽孢，这都很正常。片子中的透明圈不明显。

可能是菌太多导致透明圈不明显吧，你的意思是液体培养的时候白色沉淀也是乳酸菌吧？
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8楼2012-08-01 18:04:31
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小小佐罗2

木虫 (正式写手)
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12楼: Originally posted by 仰望星空的鱼 at 2012-08-03 16:52:58
定量的话可不可以先做个生长曲线，确定OD值和活菌含量的关系，以后就直接测吸光度了。

谢谢 关键没测OD的仪器
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13楼2012-08-04 09:37:02
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小小佐罗2

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by dreamzxw at 2012-08-03 15:25:55
感觉用血球计数的话误差会很大，还有就是你把涂布法改成混菌法会不会好些呢？

准备用涂板法
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14楼2012-08-04 09:37:29
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