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黄粉虫

银虫 (小有名气)

[求助] 大家来帮我分析下双向电泳图吧!

各位2D高手们,能帮我看下么?我提取的胎盘总蛋白,每次结果在碱性段的下方都有这么一大条,不晓得是怎么了?一开始聚焦时电压上不去,超滤除盐之后,电压可以达到4000V,但是结果没大变化。
怀疑是高丰度蛋白影响,PAGE胶结果显示66.5KD处的确有很浓一条带,因此提取蛋白时,仔细把胎盘组织中的血冲洗干净,3KD超滤管除盐后上样,电压聚焦正常,跑出来的结果还是这样。
大家帮忙看看吧,不晓得是什么原因?
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dongxie1982

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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黄粉虫: 金币+1 2012-08-01 11:02:01
点也太少了吧?!LZ可以尝试在裂解液和水化里加些两性电解液,有助于蛋白的提取和聚焦
2楼2012-07-31 21:00:53
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黄粉虫

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dongxie1982 at 2012-07-31 21:00:53
点也太少了吧?!LZ可以尝试在裂解液和水化里加些两性电解液,有助于蛋白的提取和聚焦

我是试剂盒提取蛋白的,提取的蛋白沉淀直接加水化液溶解的,会有问题么?点很少感觉是没跑出来啊,跑的PAGE胶里面能看到很多条带啊!
3楼2012-08-01 10:54:01
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