24小时热门版块排行榜    

查看: 2113  |  回复: 9
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zjutboss

银虫 (小有名气)

[求助] 酵母菌中酶的分离提取

筛选得到一株酵母菌,打算从中提取一种羰基还原酶。通过高压匀浆破碎,离心,得到的上清液中无酶活,而细胞碎片中却有酶活。通过镜检得知细胞已有效破碎。请教给位高手:
(1)目的蛋白是否为膜结合蛋白;
(2)怎样从细胞碎片中提取目的蛋白。
请给位做酶分离纯化的高手不吝赐教!小弟万分感谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zjutboss: 金币+3, 有帮助, 我也这样认为,谢谢! 2012-07-25 13:52:47
引用回帖:
4楼: Originally posted by reallpf at 2012-07-24 16:15:27
关于膜蛋白的证明,我了解的有一下几个方法:
1.膜蛋白跨膜区复含疏水氨基酸,所以可以测序后大致判断。一般可以看到疏水-亲水氨基酸的间隔排列,10个左右的氨基酸可以构成跨膜区。

2.荧光标记,GFP当然是一个 ...

你的3个建议都建立在蛋白质已经纯化并且得到氨基酸序列的基础上,不符合楼主情况。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2012-07-24 18:36:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

zjutboss

银虫 (小有名气)

求指导啊,不胜感谢!
2楼2012-07-24 15:40:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zjutboss: 金币+3, 有帮助, 这个是不是很贵,我看了产品介绍,可用50次,一次只能处理10的7次方个细胞! 2012-07-25 13:51:55
是否是膜蛋白我觉得仅仅根据你的描述是不能确定的,还需要做一些证明。而对于膜蛋白的提取可以试试Thermo Scientific Mem-PER真核细胞膜蛋白抽提试剂盒,有朋友说用过。
3楼2012-07-24 16:06:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
scelab: 金币+3, MicEPI+1, 不错的建议 2012-07-24 16:40:46
zjutboss: 金币+5, 有帮助 2012-07-25 13:50:08
关于膜蛋白的证明,我了解的有一下几个方法:
1.膜蛋白跨膜区复含疏水氨基酸,所以可以测序后大致判断。一般可以看到疏水-亲水氨基酸的间隔排列,10个左右的氨基酸可以构成跨膜区。

2.荧光标记,GFP当然是一个不错的办法,

3.制备抗体,分离原来物种的膜蛋白,然后电泳,western。

我觉得第3条是比较适合你的。个人见解,仅供参考。
4楼2012-07-24 16:15:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:29 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 9/450 2026-08-29 09:59 by jklily
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 05:45 by gy1nBQXYQJqL
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 基金不中,共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见