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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 酵母菌中酶的分离提取
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zjutboss

银虫 (小有名气)

[求助] 酵母菌中酶的分离提取

筛选得到一株酵母菌，打算从中提取一种羰基还原酶。通过高压匀浆破碎，离心，得到的上清液中无酶活，而细胞碎片中却有酶活。通过镜检得知细胞已有效破碎。请教给位高手：
（1）目的蛋白是否为膜结合蛋白；
（2）怎样从细胞碎片中提取目的蛋白。
请给位做酶分离纯化的高手不吝赐教！小弟万分感谢！
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1楼 2012-07-24 11:01:28
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zjutboss: 金币+3, ★有帮助, 我也这样认为，谢谢！ 2012-07-25 13:52:47
引用回帖:
4楼: Originally posted by reallpf at 2012-07-24 16:15:27
关于膜蛋白的证明，我了解的有一下几个方法：
1.膜蛋白跨膜区复含疏水氨基酸，所以可以测序后大致判断。一般可以看到疏水－亲水氨基酸的间隔排列，10个左右的氨基酸可以构成跨膜区。

2.荧光标记，GFP当然是一个 ...

你的3个建议都建立在蛋白质已经纯化并且得到氨基酸序列的基础上，不符合楼主情况。
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2012-07-24 18:36:30
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