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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 重叠延伸PCR第一轮做出来了，但是第二轮P不出来
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飘零的叶子

新虫 (小有名气)

[交流] 重叠延伸PCR第一轮做出来了，但是第二轮P不出来

我现在要做重叠延伸，第一轮PCR的两个片段都P出来了，核酸电泳的位置也是正确的，但是第二轮PCR总是P不出来，跑电泳时在100bp及250bp左右有很亮的条带，但是我的目的片段是在1400bp左右！哪位大侠知道这是什么原因啊？！
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1楼 2012-07-20 13:03:48
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smdsfy

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看一下你得到的两个片段的亮度，调整它们之间的比例，另外，你还有看引物与使用的模板的摩尔比，调整一下，，你说有引物二聚体的话，引物应该没有问题，把片段A与B的比例调整一下，祝你成功！
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24楼2012-07-23 15:34:44
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