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soffy0214

铜虫 (小有名气)

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[求助] 今天提了一天的RNA，结果在紫外下只看到一团黑色。求分析！

我很确定我的rna是提出来了的。我用甲醛变性胶，加2微升EB，胶是红色的。然后加10微升样电泳，样中加4微升甲醛，2微升上样缓冲液，2微升10倍的MOPS缓冲液。检测时什么都看不见，只在溴酚蓝的位置看到一团黑色的东西。A260和A280都是负值。我的RNA哪去了？求解！

[ Last edited by soffy0214 on 2012-7-19 at 08:24 ]

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上帝关上一扇门，就会打开一扇窗。

1楼 2012-07-18 23:04:14

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chenguestc

木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-07-19 15:18:46

A260，280以及A260/280比值都可以用于分析RNA纯度。你的值都是负的，说明RNA降解了或没有提出来。你提出的白色沉淀有可能只是组蛋白，一般提出RNA应该是胶状和管差不多颜色而非白色沉淀，或者你获得的RNA量太多和部分蛋白沉淀在一起形成白色物，但是从你的A260，280值来看，是没有提出来。白色的应该是组蛋白，因为组蛋白溶解于水和稀酸。