24小时热门版块排行榜    

查看: 2544  |  回复: 6

hanreil

铁虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌菌悬液如何配

我是从别的实验室要来的在试管里斜面划好的大肠杆菌,我现在做一大肠的菌悬液。该怎么弄?
我是先做的液体培养基,然后就直接用接种环把斜面上的细菌取了一小块放在液体培养基里了。我想问下 这样就可以直接用吗?还是得放在摇床上培养24H。
我自己是放在摇床上了245H,可是貌似没什么变化,培养基也没变浑浊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuyisit

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hanreil: 金币+1 2012-07-17 21:52:03
一般大肠杆菌要用LB液体培养基,培养基需要灭菌。灭菌后需要冷却到室温再接种,在无菌条件下(一般是超净工作台)用接种环接种。接种后在30-37度根据需要培养一段时间。中间可以测定OD600来检测生长状态。如果是重组大肠杆菌,还需要根据其质粒中的抗性标记,在LB培养基中加入相应的抗生素。以上内容希望能对你有帮助。
2楼2012-07-16 18:13:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hanreil: 金币+1, 有帮助 2012-07-17 21:51:52
从别处拿来的?最好活化一下,平板活化最好,要了解清楚是否有抗性。活化后再接种液体培养基LB。
3楼2012-07-16 18:40:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanreil

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by reallpf at 2012-07-16 18:40:54
从别处拿来的?最好活化一下,平板活化最好,要了解清楚是否有抗性。活化后再接种液体培养基LB。

怎么活化啊
4楼2012-07-17 21:25:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanreil

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xuyisit at 2012-07-16 18:13:59
一般大肠杆菌要用LB液体培养基,培养基需要灭菌。灭菌后需要冷却到室温再接种,在无菌条件下(一般是超净工作台)用接种环接种。接种后在30-37度根据需要培养一段时间。中间可以测定OD600来检测生长状态。如果是重组 ...

我用LB的斜面直接接种就可以吗?
5楼2012-07-17 21:26:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by hanreil at 2012-07-17 21:25:43
怎么活化啊...

就是拍固体平板上划线活化一下,保证菌的活力。
6楼2012-07-17 21:33:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

配个LB固体培养基,灭菌后在培养皿中倒平板,挑取斜面上的菌在平板上划线(无菌操作),37℃培养12-24h,(若活化效果不好,菌长得不旺盛,可再活化一次)挑取菌种接种到液体LB培养基中,震荡(220rpm)培养12h就成菌悬液。
7楼2012-07-17 21:57:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hanreil 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见