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单链DNA的PAGE具体操作
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| 大家好 因为刚接触这个聚丙烯酰胺凝胶电泳,懂的甚少,最近也在查相关的知识,可是老板要求特别紧 ,让我自己尽快摸索出来,我的DNA就是35个碱基,用一些方法将他断链,所以想用PAGE验证一下是否形成了DNA片段,应该在用PAGE能看出来吧,求指点具体操作的步骤和注意事项 不胜感激。 |
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zhoubinzeng
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7楼2012-07-17 11:23:51
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【答案】应助回帖
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xiong-y-x: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-07-16 16:55:46
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核酸的PAGE与蛋白相似,仅是把蛋白PAGE的缓冲液换成核酸缓冲液,注重配胶时的浓度,仅一层胶就行。染色时把胶放置染色皿中,加1X缓冲液,滴加EB振荡染色10-20分,放置在紫外检测以上检测即可。很简单的,你可以试试,祝你成功。 跑核酸的PAGE,不用加SDS的。用TBE的电泳缓冲液,15×17cm的12%的PAGE胶足够分离,电泳到二甲苯完全迁出,溴酚蓝距底边2~3cm停止,1ug/ml EB 染胶2~5min,紫外线看就ok了,试剂配方参见分子克隆或是Takara目录后的附录。 |

2楼2012-07-16 12:28:13
zhoubinzeng
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4楼2012-07-16 14:30:48














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