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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 单链DNA的PAGE具体操作
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xiong-y-x

金虫 (正式写手)

[求助] 单链DNA的PAGE具体操作

大家好 因为刚接触这个聚丙烯酰胺凝胶电泳，懂的甚少，最近也在查相关的知识，可是老板要求特别紧 ，让我自己尽快摸索出来，我的DNA就是35个碱基，用一些方法将他断链，所以想用PAGE验证一下是否形成了DNA片段，应该在用PAGE能看出来吧，求指点具体操作的步骤和注意事项 不胜感激。
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1楼 2012-07-16 11:12:42
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zhoubinzeng

新虫 (初入文坛)
请问胶浓度是如何选择的？
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3楼2012-07-16 13:19:09
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zhoubinzeng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PAGE凝胶电泳跑核酸 不是有20%的胶浓度吗 是碱基数越少 选择的胶浓度越大吗 我有一条链是26bp 一条是52 还有是这两条杂交的78 选择的胶浓度大概多大？ 可以用变性尿素凝胶电泳分开不？ 你有没有具体的实验操作步骤及试剂的配置方法 ，是新手 请多多指导下，我现在配置的胶都不凝固 配方是15.2g 丙烯酰胺，0.8g 甲叉双丙烯酰胺 10ml 10*TBE，42g尿素 100ml双蒸水溶解定容  求原因
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6楼2012-07-17 11:04:12
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zhoubinzeng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

15.2g 丙烯酰胺，0.8g 甲叉双丙烯酰胺 10ml 10*TBE，42g尿素 100ml双蒸水溶解定容至100ml  取6ml 这种溶液与 70ul10%过硫酸铵 （新配置的）4ul TEMED 33度下一天一夜也没凝固 求原因
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7楼2012-07-17 11:23:51
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