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单链DNA的PAGE具体操作
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| 大家好 因为刚接触这个聚丙烯酰胺凝胶电泳，懂的甚少，最近也在查相关的知识，可是老板要求特别紧 ，让我自己尽快摸索出来，我的DNA就是35个碱基，用一些方法将他断链，所以想用PAGE验证一下是否形成了DNA片段，应该在用PAGE能看出来吧，求指点具体操作的步骤和注意事项 不胜感激。 |
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tupac225
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4楼2012-07-16 14:30:48
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【答案】应助回帖
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xiong-y-x: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-07-16 16:55:46
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核酸的PAGE与蛋白相似，仅是把蛋白PAGE的缓冲液换成核酸缓冲液，注重配胶时的浓度，仅一层胶就行。染色时把胶放置染色皿中，加1X缓冲液，滴加EB振荡染色10-20分，放置在紫外检测以上检测即可。很简单的，你可以试试，祝你成功。 跑核酸的PAGE，不用加SDS的。用TBE的电泳缓冲液，15×17cm的12％的PAGE胶足够分离，电泳到二甲苯完全迁出，溴酚蓝距底边2～3cm停止，1ug/ml EB 染胶2～5min，紫外线看就ok了，试剂配方参见分子克隆或是Takara目录后的附录。 |
2楼2012-07-16 12:28:13
zhoubinzeng
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5楼2012-07-16 17:01:28
20