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shaozheyun银虫 (小有名气)
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二硫苏糖醇（简称DTT）破坏蛋白质二硫键
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我要用二硫苏糖醇（简称DTT）破坏蛋白质中的二硫键，蛋白浓度为0.05%（0.5mg/mL），但我对二硫苏糖醇不是很了解，有几个问题想要请教一下： 1.DTT在使用时是直接用固体溶解在蛋白溶液还是要先配成高浓度溶液再使用？ 2.对于1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液的配制 【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT，过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。 这样的DTT溶液的配制方法对吗？ DTT在PH大于7时表现还原性，而配置时是pH5.2是为了防止在贮藏时被氧化吗？ 3.DTT的工作浓度大约是多少？就是说，在用它去破坏二硫键时要用多大的浓度？？ 敬请期待各位高手为我答疑解惑！不胜感激！！！ |
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2楼2012-07-13 15:10:01