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海洋之滨

木虫 (正式写手)

coffee dependent

[求助] DTT会打开金硫键吗?

初始悬赏金币 100 个
实验中用到含DTT的一个蛋白,蛋白溶液在金电极上反应一段时间后,阻抗明显减小,电极上只有巯基DNA和巯基己烷,确定是因为DTT的存在。不知道是因为DTT打开了金硫键还是因为二硫键的存在,怎么去除DTT或者怎么消除影响?
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不多时暮霭风吹散,西山看我,我看西山。
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evowill

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
海洋之滨: 金币+100, ★★★★★最佳答案, 不打算看了,你用我听得懂的话再说一下吧 2012-12-12 15:56:48
文献里有报道DTT、巯基乙醇等会让巯基修饰的DNA脱离金表面,你可以看下A Bio-Bar-Code Assay Based upon Dithiothreitol-Induced Oligonucleotide Release,A Bio-Bar-Code Assay Based upon
Dithiothreitol-Induced Oligonucleotide Release,至于怎么解决我还没有好的办法,我也遇到过就是自己配置缓冲体系不加DTT,如果本身含有稀释一下看能不能解决,持续关注
2楼2012-12-12 15:48:57
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evowill

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Multiple thiol-anchor capped DNA–gold nanoparticle conjugates,上面粘贴出错了 还有这个,里面都有说到
3楼2012-12-12 15:55:47
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keqindeng

木虫 (正式写手)

如果蛋白溶液中含有DTT可用透析法除去。
Electrical Detection of TATA Binding Protein at DNA-Modified Microelectrodes, J. Am. Chem. Soc., 2008, 130 (10), pp 2924–2925 DOI: 10.1021/ja7106756 文章附件的最后一段有提到。
4楼2012-12-18 09:07:13
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evowill

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by keqindeng at 2012-12-18 09:07:13
如果蛋白溶液中含有DTT可用透析法除去。
Electrical Detection of TATA Binding Protein at DNA-Modified Microelectrodes, J. Am. Chem. Soc., 2008, 130 (10), pp 2924–2925 DOI: 10.1021/ja7106756 文章附件的 ...

哈哈,我用的就是这个蛋白,没仔细看支持信息。透析的话蛋白的量可能不够,问了别人可能用超滤离心管比较好。
5楼2012-12-20 14:01:40
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