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用天根琼脂糖回收试剂盒中的eb洗脱,会影响后续的连接转换,测序吗?
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eesing
金虫
(正式写手)
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虫号: 1176581
[交流]
用天根琼脂糖回收试剂盒中的eb洗脱,会影响后续的连接转换,测序吗?
如题,载体为takara的pmd18-T,最近总长阳性菌很少,且概率低,谢谢各位了
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1楼
2012-06-30 11:58:47
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Marado
金虫
(正式写手)
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虫号: 1512351
★ ★ ★
eesing(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流
2012-07-02 13:40:14
应该不会吧,虽然我们用的不是天根的胶回收试剂盒,但是貌似最后一步用的也是试剂盒自带的洗脱液,没出现过影响后面连接的情况,楼主是不是检查一下回收效率,估计回收后浓度太低, 可以减少洗脱液量,我们那个试剂盒最后一步洗脱液建议量为30-50Ul,我一般都加35的.
祝楼主好运.
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21楼
2012-07-01 22:13:26
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xuejunwang
木虫
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在线: 260.9小时
虫号: 1337696
★
eesing(金币+1): 谢谢参与
理论上不影响,如果怀疑可以用超纯水直接洗脱啊,或将EB稀释几倍
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9楼
2012-06-30 14:18:59
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syn1985
木虫
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在线: 273.2小时
虫号: 463029
★
eesing(金币+1): 谢谢参与
我一般不用他自带的洗脱液 因为用这个洗脱液洗脱的PCR产物直接送公司测序会测不出来 不够我也见过他们直接用的 好像也没多大问题 我觉得连不上最大问题是浓度
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13楼
2012-06-30 15:06:11
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