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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用天根琼脂糖回收试剂盒中的eb洗脱，会影响后续的连接转换，测序吗？
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eesing

金虫 (正式写手)

[交流] 用天根琼脂糖回收试剂盒中的eb洗脱，会影响后续的连接转换，测序吗？

如题，载体为takara的pmd18-T，最近总长阳性菌很少，且概率低，谢谢各位了
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1楼 2012-06-30 11:58:47
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Marado

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
eesing(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-02 13:40:14
应该不会吧，虽然我们用的不是天根的胶回收试剂盒，但是貌似最后一步用的也是试剂盒自带的洗脱液，没出现过影响后面连接的情况，楼主是不是检查一下回收效率，估计回收后浓度太低， 可以减少洗脱液量，我们那个试剂盒最后一步洗脱液建议量为30-50Ul，我一般都加35的.
祝楼主好运.
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21楼2012-07-01 22:13:26
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xuejunwang

木虫 (小有名气)
★
eesing(金币+1): 谢谢参与
理论上不影响，如果怀疑可以用超纯水直接洗脱啊，或将EB稀释几倍
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9楼2012-06-30 14:18:59
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syn1985

木虫 (正式写手)
★
eesing(金币+1): 谢谢参与
我一般不用他自带的洗脱液 因为用这个洗脱液洗脱的PCR产物直接送公司测序会测不出来 不够我也见过他们直接用的 好像也没多大问题  我觉得连不上最大问题是浓度
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13楼2012-06-30 15:06:11
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