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xiajuan9

新虫 (小有名气)

[交流] 链霉菌接合转移 已有7人参与

有哪位前辈知道链霉菌接合转移最关键的是什么?本人做链霉菌,构建好了质粒从大肠杆菌ET12567/pUZ8002带质粒的菌往链霉菌转化,总转不进去,有没有别的更好的方法?该注意什么呢?
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果子么么茶

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-06 21:47:14
我做的50℃热激10min 1h内与洗涤好的大肠混匀 涂布 18h后涂萘啶酮酸和抗生素
我觉得涂抗生素的时间也很重要  孢子浓度 大肠浓度很重要
ps 会不会孢子活性不行
7楼2012-07-05 22:01:09
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doriscc

金虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你应该把你做的具体步骤说的详细点,这样可以对症下药。一般整合型的是比较容易的,同源重组的效率会低很多。
2楼2012-06-23 21:14:56
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小小亚杰

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
理论上这样做就行了,但根据不同的链霉菌,接合转移程度不同。
3楼2012-06-24 15:55:07
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以先尝试pSET152载体 ,进行摸索,建立遗传转化体系。一般链霉菌相对容易接合转移...
4楼2012-06-25 06:14:04
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