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xiajuan9

新虫 (小有名气)

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[交流] 链霉菌接合转移已有7人参与

有哪位前辈知道链霉菌接合转移最关键的是什么？本人做链霉菌，构建好了质粒从大肠杆菌ET12567/pUZ8002带质粒的菌往链霉菌转化，总转不进去，有没有别的更好的方法？该注意什么呢？

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小小亚杰

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1楼 2012-06-22 10:50:17

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果子么么茶

木虫 (著名写手)

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zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-06 21:47:14

我做的50℃热激10min 1h内与洗涤好的大肠混匀涂布 18h后涂萘啶酮酸和抗生素
我觉得涂抗生素的时间也很重要孢子浓度大肠浓度很重要
ps 会不会孢子活性不行

7楼2012-07-05 22:01:09

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doriscc

金虫 (初入文坛)

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专业: 微生物生理与生物化学

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你应该把你做的具体步骤说的详细点，这样可以对症下药。一般整合型的是比较容易的，同源重组的效率会低很多。

2楼2012-06-23 21:14:56

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小小亚杰

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理论上这样做就行了，但根据不同的链霉菌，接合转移程度不同。

3楼2012-06-24 15:55:07

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克隆大虾

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可以先尝试pSET152载体，进行摸索，建立遗传转化体系。一般链霉菌相对容易接合转移...

4楼2012-06-25 06:14:04

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