24小时热门版块排行榜    

查看: 3452  |  回复: 13

syn1985

木虫 (正式写手)

[求助] 接合转移实验现象求助

我上周第一次做大肠杆菌和链霉菌的接合转移,用的pSET152做穿梭质粒,大肠是ET12567(pUZ8002),结合后18个小时抹上萘啶酮酸和Am,然后让他长,放了大概有3d-4d后他上面有单菌落出现,但是菌落表面非常光滑和亮,看着好像大肠啊,后来我就传代,在萘啶酮酸和Am的MS板子上传了一代,他还是那么的光亮,只是菌落不是透明的,我现在头都大了,看那菌株的样子怎么看都不像我原来那株菌(原来菌丝体颜色是黄色的,孢子白色的),
大家帮我分析分析啊 谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

srlee

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

syn1985(金币+10): 谢谢 2011-07-07 15:03:47
不同的链霉菌,菌落形态也大不相同的,让它多长几天还是很容易分辨的,接合转移抗生素覆盖后部分大肠杆菌也会长出来的,但是链霉菌还是很好认的。
2楼2011-07-05 20:49:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syn1985

木虫 (正式写手)

问题我解决了,我这菌直接用孢子悬浮液涂平板就长那个样子,不过还是要谢谢你
3楼2011-07-07 15:04:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

二十

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by syn1985 at 2011-07-07 15:04:35:
问题我解决了,我这菌直接用孢子悬浮液涂平板就长那个样子,不过还是要谢谢你

没做对照就做结合转移了?或者说你不知道自己的菌在MS上长的什么样子?这是实验的问题吧。
您做的菌产物是什么能告诉一下么?
且行且珍惜......
4楼2011-07-11 20:58:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syn1985

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 二十 at 2011-07-11 20:58:06:
没做对照就做结合转移了?或者说你不知道自己的菌在MS上长的什么样子?这是实验的问题吧。
您做的菌产物是什么能告诉一下么?

我之前做过一次 不过不是用孢子悬浮液涂的 而是从保种管中转接的,所以形态不一样
5楼2011-07-11 21:05:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fushxmy

金虫 (正式写手)

你好,我们最近也一直在做链霉菌的结合转移。但是都没有成功,主要是在16h后加上萘啶酮酸后,大肠长的还是很厉害。有没有好的方法解决一下。谢谢!
秦皇汉武
6楼2012-02-16 12:52:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张玉杰

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by syn1985 at 2011-06-14 09:55:27:
我上周第一次做大肠杆菌和链霉菌的接合转移,用的pSET152做穿梭质粒,大肠是ET12567(pUZ8002),结合后18个小时抹上萘啶酮酸和Am,然后让他长,放了大概有3d-4d后他上面有单菌落出现,但是菌落表面非常光滑和亮,看 ...

请问 你转移后的平板 有没有整体呈现白色雾状的样子?我也做链霉菌的结合转移,涂的平板加上抗生素之后 都是白色雾状的,不好区分长出的链霉菌。我的还有在三天的时候就长成白茫茫的一片,这是什么原因,您能给解释下吗?谢谢
7楼2012-02-22 16:48:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tanche163

捐助贵宾 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 张玉杰 at 2012-02-22 16:48:08:
请问 你转移后的平板 有没有整体呈现白色雾状的样子?我也做链霉菌的结合转移,涂的平板加上抗生素之后 都是白色雾状的,不好区分长出的链霉菌。我的还有在三天的时候就长成白茫茫的一片,这是什么原因,您能给解 ...

可能是你的抗生素失效了,或者加抗生素时间太晚,做个对照看看
阳光总在风雨后
8楼2012-02-24 11:44:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tanche163

捐助贵宾 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by fushxmy at 2012-02-16 12:52:58:
你好,我们最近也一直在做链霉菌的结合转移。但是都没有成功,主要是在16h后加上萘啶酮酸后,大肠长的还是很厉害。有没有好的方法解决一下。谢谢!

大肠量太多,不必担心大肠不够,那玩意一点点就很多了
阳光总在风雨后
9楼2012-02-24 11:44:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

盈月泛星

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2359217楼: Originally posted by tanche163 at 2012-02-24 11:44:52
大肠量太多,不必担心大肠不够,那玩意一点点就很多了...

你好 最近我也有用pSET152做菌丝体接合转移,然后接合子长了,但是产量与预期的结果是不一样的,就是差了。所以我想问得是:是不是放线菌染色体组内的整合位点不止一个,而是多个?想请哪位对此类熟悉的大侠给个提点,谢谢
考研也要加紧联系群体
10楼2013-03-26 16:45:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 syn1985 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +5 scalable 2026-08-24 5/250 2026-08-24 17:03 by spiderzhuzhi
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +19 koalala 2026-08-24 21/1050 2026-08-24 16:48 by Wei_ren
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见