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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 接合转移实验现象求助
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syn1985

木虫 (正式写手)

[求助] 接合转移实验现象求助

我上周第一次做大肠杆菌和链霉菌的接合转移，用的pSET152做穿梭质粒，大肠是ET12567(pUZ8002)，结合后18个小时抹上萘啶酮酸和Am，然后让他长，放了大概有3d-4d后他上面有单菌落出现，但是菌落表面非常光滑和亮，看着好像大肠啊，后来我就传代，在萘啶酮酸和Am的MS板子上传了一代，他还是那么的光亮，只是菌落不是透明的，我现在头都大了，看那菌株的样子怎么看都不像我原来那株菌（原来菌丝体颜色是黄色的，孢子白色的），
大家帮我分析分析啊 谢谢
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1楼 2011-06-14 09:55:27
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srlee

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

syn1985(金币+10): 谢谢 2011-07-07 15:03:47
不同的链霉菌，菌落形态也大不相同的，让它多长几天还是很容易分辨的，接合转移抗生素覆盖后部分大肠杆菌也会长出来的，但是链霉菌还是很好认的。
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2楼2011-07-05 20:49:19
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syn1985

木虫 (正式写手)
问题我解决了，我这菌直接用孢子悬浮液涂平板就长那个样子，不过还是要谢谢你
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3楼2011-07-07 15:04:35
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二十

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by syn1985 at 2011-07-07 15:04:35:
问题我解决了，我这菌直接用孢子悬浮液涂平板就长那个样子，不过还是要谢谢你

没做对照就做结合转移了？或者说你不知道自己的菌在MS上长的什么样子？这是实验的问题吧。
您做的菌产物是什么能告诉一下么？
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且行且珍惜......
4楼2011-07-11 20:58:06
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syn1985

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 二十 at 2011-07-11 20:58:06:
没做对照就做结合转移了？或者说你不知道自己的菌在MS上长的什么样子？这是实验的问题吧。
您做的菌产物是什么能告诉一下么？

我之前做过一次 不过不是用孢子悬浮液涂的 而是从保种管中转接的，所以形态不一样
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5楼2011-07-11 21:05:43
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fushxmy

金虫 (正式写手)
你好，我们最近也一直在做链霉菌的结合转移。但是都没有成功，主要是在16h后加上萘啶酮酸后，大肠长的还是很厉害。有没有好的方法解决一下。谢谢！
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秦皇汉武
6楼2012-02-16 12:52:58
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张玉杰

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by syn1985 at 2011-06-14 09:55:27:
我上周第一次做大肠杆菌和链霉菌的接合转移，用的pSET152做穿梭质粒，大肠是ET12567(pUZ8002)，结合后18个小时抹上萘啶酮酸和Am，然后让他长，放了大概有3d-4d后他上面有单菌落出现，但是菌落表面非常光滑和亮，看 ...

请问 你转移后的平板 有没有整体呈现白色雾状的样子？我也做链霉菌的结合转移，涂的平板加上抗生素之后 都是白色雾状的，不好区分长出的链霉菌。我的还有在三天的时候就长成白茫茫的一片，这是什么原因，您能给解释下吗？谢谢
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7楼2012-02-22 16:48:08
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tanche163

捐助贵宾 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 张玉杰 at 2012-02-22 16:48:08:
请问 你转移后的平板 有没有整体呈现白色雾状的样子？我也做链霉菌的结合转移，涂的平板加上抗生素之后 都是白色雾状的，不好区分长出的链霉菌。我的还有在三天的时候就长成白茫茫的一片，这是什么原因，您能给解 ...

可能是你的抗生素失效了，或者加抗生素时间太晚，做个对照看看
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阳光总在风雨后
8楼2012-02-24 11:44:10
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tanche163

捐助贵宾 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by fushxmy at 2012-02-16 12:52:58:
你好，我们最近也一直在做链霉菌的结合转移。但是都没有成功，主要是在16h后加上萘啶酮酸后，大肠长的还是很厉害。有没有好的方法解决一下。谢谢！

大肠量太多，不必担心大肠不够，那玩意一点点就很多了
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阳光总在风雨后
9楼2012-02-24 11:44:52
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盈月泛星

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2359217楼: Originally posted by tanche163 at 2012-02-24 11:44:52
大肠量太多，不必担心大肠不够，那玩意一点点就很多了...

你好 最近我也有用pSET152做菌丝体接合转移，然后接合子长了，但是产量与预期的结果是不一样的，就是差了。所以我想问得是：是不是放线菌染色体组内的整合位点不止一个，而是多个？想请哪位对此类熟悉的大侠给个提点，谢谢
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考研也要加紧联系群体
10楼2013-03-26 16:45:01
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