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syn1985

木虫 (正式写手)

[求助] 接合转移实验现象求助

我上周第一次做大肠杆菌和链霉菌的接合转移,用的pSET152做穿梭质粒,大肠是ET12567(pUZ8002),结合后18个小时抹上萘啶酮酸和Am,然后让他长,放了大概有3d-4d后他上面有单菌落出现,但是菌落表面非常光滑和亮,看着好像大肠啊,后来我就传代,在萘啶酮酸和Am的MS板子上传了一代,他还是那么的光亮,只是菌落不是透明的,我现在头都大了,看那菌株的样子怎么看都不像我原来那株菌(原来菌丝体颜色是黄色的,孢子白色的),
大家帮我分析分析啊 谢谢
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盈月泛星

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2359217楼: Originally posted by tanche163 at 2012-02-24 11:44:52
大肠量太多,不必担心大肠不够,那玩意一点点就很多了...

你好 最近我也有用pSET152做菌丝体接合转移,然后接合子长了,但是产量与预期的结果是不一样的,就是差了。所以我想问得是:是不是放线菌染色体组内的整合位点不止一个,而是多个?想请哪位对此类熟悉的大侠给个提点,谢谢
考研也要加紧联系群体
10楼2013-03-26 16:45:01
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查看全部 14 个回答

srlee

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

syn1985(金币+10): 谢谢 2011-07-07 15:03:47
不同的链霉菌,菌落形态也大不相同的,让它多长几天还是很容易分辨的,接合转移抗生素覆盖后部分大肠杆菌也会长出来的,但是链霉菌还是很好认的。
2楼2011-07-05 20:49:19
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syn1985

木虫 (正式写手)

问题我解决了,我这菌直接用孢子悬浮液涂平板就长那个样子,不过还是要谢谢你
3楼2011-07-07 15:04:35
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二十

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by syn1985 at 2011-07-07 15:04:35:
问题我解决了,我这菌直接用孢子悬浮液涂平板就长那个样子,不过还是要谢谢你

没做对照就做结合转移了?或者说你不知道自己的菌在MS上长的什么样子?这是实验的问题吧。
您做的菌产物是什么能告诉一下么?
且行且珍惜......
4楼2011-07-11 20:58:06
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