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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量PCR里的酶活化的小疑问
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xiao7270

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 荧光定量PCR里的酶活化的小疑问

看到说明书里说道：

Instrument                    Step                   Temperature   (°C)      Duration    Cycles
7900HT Fast   AmpliTaq® Fast DNA              95                           20 sec     HOLD
                        Polymerase, UP
                             Activation
                              Denature                      95                           1 sec         40
                        Anneal/Extend                    60                             20 sec

不太理解活化那一步里，hold是什么意思。就是95度保持20s，还是95度持续一段时间？

[ Last edited by xiao7270 on 2012-6-14 at 10:01 ]
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1楼 2012-06-14 10:00:02
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xiao7270

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by beautybanana at 2012-06-14 11:02:55
这是2步法，第一步95°C，20s，酶的热启动，时间是20s。后面是第2步PCR反应部分，95°C，1s，60°C，20s，共40个循环。

另外，UDG 50度保温时间是仪器里默认的？还是要手动设置？
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4楼2012-06-14 14:52:45
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beautybanana

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xiao7270: 金币+2, 谢谢！另外，UDG 50度保温时间是仪器里默认的？还是要手动设置？ 2012-06-14 11:54:53
这是2步法，第一步95°C，20s，酶的热启动，时间是20s。后面是第2步PCR反应部分，95°C，1s，60°C，20s，共40个循环。
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-14 11:02:55
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beautybanana

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiao7270 at 2012-06-14 14:52:45
另外，UDG 50度保温时间是仪器里默认的？还是要手动设置？...

应该是默认设置，如果没有就要手动补充上去。
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5楼2012-06-14 19:26:13
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xiao7270

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by beautybanana at 2012-06-14 19:26:13
应该是默认设置，如果没有就要手动补充上去。...

不太清楚手动上去的保温时间
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6楼2012-06-18 09:27:38
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