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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » pH示差法的原理和计算公式
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wangtingbin

新虫 (小有名气)

[求助] pH示差法的原理和计算公式

想采取pH示差法测定花青素的含量，没有找到关于该方法的具体理论，请问各位虫友，该方法的原理和具体操作注意事项，尤其是计算公式的依据和含义是什么？
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不卑不亢 厚积薄发
1楼 2012-06-11 09:19:14
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lq冰果

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有单一PH值方法，也有两种PH值的示差法。花青素含量(%, w/w)=(A/εL)×MW×DF×V/Wt×100
式中: A──吸光度;
ε———矢车菊花素- 3- 葡萄糖苷的消光系
数, 26900;
DF──稀释因子;
MW———矢车菊花素- 3- 葡萄糖苷的分子
量, 449.2;
V──最终体积, mL;
Wt———产品重量, mg;
L──光程, 1cm;
A=(A510nmpH1.0- A700nmpH1.0)- (A510nmpH4.5 -pH4.5)
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10楼2013-05-01 09:30:53
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普通回帖

lwwlife

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
中药2000: 金币+1, 谢谢 2012-06-14 22:28:53
pH示差法测定花青素的含量，查 百度文库 就有啊
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2楼2012-06-11 10:07:37
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lwwlife

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
中药2000: 金币+2, 谢谢 2012-06-14 22:29:02
中药2000: 回帖置顶 2012-06-14 22:29:05
在溶液介质中花青素会随pH的改变而有几种结构的转变，其结构的转变是pH 的函数，而干扰物的特征光谱不随pH的改变而发生变化。所以通过两个pH、同一波长（花青素最大吸收波长）下的吸光值差，结合Fuleki T公式就可以测得花青素的含量。
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3楼2012-06-11 10:33:34
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wangtingbin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lwwlife at 2012-06-11 10:33:34
在溶液介质中花青素会随pH的改变而有几种结构的转变，其结构的转变是pH 的函数，而干扰物的特征光谱不随pH的改变而发生变化。所以通过两个pH、同一波长（花青素最大吸收波长）下的吸光值差，结合Fuleki T公式就可以 ...

嗯 这个我是知道的 只是不明白计算公式的含义 麻烦给解释下
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不卑不亢 厚积薄发
4楼2012-06-14 19:28:41
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wangtingbin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lwwlife at 2012-06-11 10:07:37
pH示差法测定花青素的含量，查 百度文库 就有啊

不太明白 计算公式
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不卑不亢 厚积薄发
5楼2012-06-14 19:28:59
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tianna5678

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有人能好好解释下公式不？还有为什么要在530与700两个波长下检测？不是说一个波长吗？
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6楼2012-07-08 10:30:03
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chuangwaiyu

铁虫 (初入文坛)
???????:
6?: Originally posted by tianna5678 at 2012-07-08 10:30:03
??????ú??????????????????????530??700??????????????????????????

530nm是花???素的最大???收波长，700处的测??是修正样??中???能由胶体引起的光散射的影??
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7楼2012-07-13 21:24:35
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604540357

金虫 (小有名气)

战神

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by tianna5678 at 2012-07-08 10:30:03
有人能好好解释下公式不？还有为什么要在530与700两个波长下检测？不是说一个波长吗？

530nm是花青素的最大吸收峰，700nm处花青素无吸收峰 ， 这么做的意义应该是扫除系统基线误差。
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静坐常思己过，闲谈莫论人非。
8楼2012-09-05 19:24:11
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wangtingbin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 604540357 at 2012-09-05 19:24:11
530nm是花青素的最大吸收峰，700nm处花青素无吸收峰 ， 这么做的意义应该是扫除系统基线误差。...

那为什么选用两个pH呢？根据计算公式得出的吸光度，是谁的吸光度，该怎么理解呢？
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不卑不亢 厚积薄发
9楼2012-09-06 08:36:22
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