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Rafael007

金虫 (小有名气)

[求助] 请教各位大虫uplc峰型的问题,谢谢

各位大虫门大家好,小虫现在有一色谱条件的问题请教大家,对于大家的帮助先在此谢过,每位回复的虫友我都会相应的赠送金币,谢谢。
问题是这样的,我最近在做几种二萜生物碱的分析,用的是uplc来做的,根据文献上的相关报道,选用的流动相是乙腈—10mmol/L碳酸氢铵(加氨水调至ph=10.5)溶液,选用的色谱柱是uplc的耐碱柱BEH C18,但是最后跑下来的结果是有些峰前延严重,峰型较差,下图中标的1号峰峰型还好,就是后面的五个峰型较差,想在此向大家请教这是什么原因,如何改善,要是都能像1号峰峰型就好了。谢谢大家。

图一是混标的色谱图,只有峰一峰型比较好,后面几个峰如何才能像峰一那样。
图二是混标和单标的对比图,放大之后,其他峰的峰型明显不好,基线也不平,如何调整呢。

这是图一,混标,只有峰一较好,其他的几个峰型都比较差



这是图二,混标和单标的对比图,单标放大后,峰型特别丑,而且基线特别的不平,我用的溶剂是二氯甲烷

[ Last edited by Rafael007 on 2012-6-9 at 16:33 ]
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Rafael007

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by vetszh1181 at 2012-06-10 20:26:34
明显流动相梯度设置不合理,而且标准品稀释溶剂和流动相差别太大。可以尝试使用流动相稀释标准品,更改流动相梯度。

为什么说梯度明显不合理啊?基于何种考虑?之所以溶样的溶剂和流动相相差大是因为样品在非惰性有机溶剂中不太稳定,然后选用了二氯甲烷!不知乙腈是否属于惰性有机溶剂。
7楼2012-06-10 21:05:28
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xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)

魂兮

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Rafael007: 金币+2, ★有帮助 2012-06-09 19:30:53
soundhorizo: 金币+2, 感谢应助 欢迎常来分析版交流指导^^ 2012-06-10 20:51:50
基线应该没问题,看图二,有两个波动都能重现,这没问题。第四个峰确实不太好,看看理论板数是多少,如果达到最低板数要求,应该就合格了。
也可以调下PH,看是不是PH影响的。
再不行就要换柱子。
红颜远,相思苦,几番意,难相付。十年情思百年渡,不斩相思不忍顾!
2楼2012-06-09 17:52:39
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Rafael007

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xbqewpq at 2012-06-09 17:52:39
基线应该没问题,看图二,有两个波动都能重现,这没问题。第四个峰确实不太好,看看理论板数是多少,如果达到最低板数要求,应该就合格了。
也可以调下PH,看是不是PH影响的。
再不行就要换柱子。

恩,试试PH的影响,主要是一般在uplc上跑出来的都是像1号峰那样的,峰型窄,看着也舒服,然后后面几个峰宽太大。
3楼2012-06-09 19:30:40
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guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Rafael007: 金币+2, ★有帮助 2012-06-09 21:31:01
soundhorizo: 金币+2, 应助辛苦 工作加油^_^ 2012-06-12 06:50:02
UPLC跑到16min,时间太长了,把总时间设定在5~8min,梯度调的快些,峰形会改善
梦想、激情、灵感、体验--che
4楼2012-06-09 20:46:10
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