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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » WB条带全出来了· ----各种条带··求分析
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gigiloveu

铜虫 (小有名气)

[交流] WB条带全出来了· ----各种条带··求分析 已有10人参与

今天显影  各种条带都出来了   
会不会是我的抗体浓度太大？ 我是10UL抗体稀释到2000ul


[ Last edited by gigiloveu on 2012-6-7 at 15:24 ]
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1楼 2012-06-07 15:23:07
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jiaxinfish

金虫 (正式写手)
★
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从背景看，就只有泳道有带，说明封闭是对的。
即使抗体浓，也不至于有这么多条带，估计是抗体的特异性不高引起。
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5楼2012-06-08 10:30:22
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丸子白菜

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
老板知道你1:200稀释，一定会心痛的
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10楼2012-06-09 19:40:24
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普通回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★ ★
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amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-07 21:01:51
看说明书吧上边都有说明，你这才1：200稀释，一般一抗都是上万倍稀释的，你这明显是一抗多了，如果说明书的稀释没问题，就是封闭没有做好
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2楼2012-06-07 15:34:40
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qjy_134

铜虫 (小有名气)
★
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抗体特异性不好，样品少上点或是抗体加大稀释度
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3楼2012-06-07 17:41:02
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cfynocry

银虫 (小有名气)
我们都1:1000稀释哈
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4楼2012-06-07 18:55:59
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rb

木虫 (著名写手)

小笨虫虫
★
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1:200虽然稍高了一点，可是也不至于这么多亚。是SC的抗体吧？换一个好点的抗体试试？
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寝室楼的大爷、大妈都是哲学家，他们每天都在思考人类最根本的三个问题：你是谁？你从哪儿来？要去哪儿？
6楼2012-06-08 13:32:28
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)
★
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会不会是二抗加错了，全是非特异性带。我这里有个人出过这样的问题，目的蛋白是小鼠的，一抗是山羊来源的，他二抗用了个抗鼠的，结果是条带全出来了
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7楼2012-06-08 17:06:17
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gigiloveu

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 子曰包子好吃 at 2012-06-08 17:06:17
会不会是二抗加错了，全是非特异性带。我这里有个人出过这样的问题，目的蛋白是小鼠的，一抗是山羊来源的，他二抗用了个抗鼠的，结果是条带全出来了

不太可能吧。我的目的蛋白是从人癌细胞提出来的。一抗是兔抗，二抗是羊抗兔。
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8楼2012-06-08 17:26:47
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lxyyzz

木虫 (小有名气)
★
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估计是一抗的特异性不行。。你对下分子量，看看你要的蛋白有没有啊
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9楼2012-06-08 20:36:41
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