应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 急求！提DNA时,超声破碎后还用加蛋白酶K吗?
131/1返回列表
查看: 4491  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhejiahuo1

铁虫 (小有名气)

[交流] 急求！提DNA时,超声破碎后还用加蛋白酶K吗?

提DNA时,超声破碎后还用加蛋白酶K吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-06-04 17:21:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heroyl

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-06 18:41:37
应该要的吧，不知道你提的什么DNA，提之后做什么，我曾经看到过超声后用蛋白酶K消化的。
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-04 21:20:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-06 18:41:29
zhejiahuo1: 金币+1, 谢谢 2012-06-17 07:01:23
具体的提取步骤不清楚，但是个人感觉应该还需要吧。超声只是破碎细胞，而蛋白酶的一个重要作用是破坏蛋白结构致其沉淀除去。当然，如果提取过程有加入SDS的操作，蛋白酶的这个作用就可以不用考虑了。
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-04 22:50:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhejiahuo1

铁虫 (小有名气)
我是加入裂解液(含SDS)后超声破碎，提了DNA后想做巢式PCR
赞一下 回复此楼
4楼2012-06-05 05:33:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+2, Good！ 2012-06-06 18:41:47
引用回帖:
3楼: Originally posted by joan198108 at 2012-06-04 22:50:20
具体的提取步骤不清楚，但是个人感觉应该还需要吧。超声只是破碎细胞，而蛋白酶的一个重要作用是破坏蛋白结构致其沉淀除去。当然，如果提取过程有加入SDS的操作，蛋白酶的这个作用就可以不用考虑了。

蛋白酶最好还是加，能保证更充分的裂解。
超声是破碎细胞。应该属于物理性破碎？
蛋白酶属于酶消化破碎，使DNA充分释放。
赞一下 回复此楼
5楼2012-06-05 08:27:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

足下客

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也认为加入蛋白酶K之后DNA的提取效果会好很多。我每次提DNA时都会加入一定比例的蛋白酶K。
赞一下 回复此楼
6楼2012-06-05 09:10:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhejiahuo1

铁虫 (小有名气)
谢谢各位！！！
回复此楼
7楼2012-06-06 15:53:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

馋猫

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
都超声了，还需要处理吗
DNA都碎掉了，不明白提DNA为什么要超声
赞一下 回复此楼
8楼2012-06-07 17:24:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

371522029

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 馋猫 at 2012-06-07 17:24:00
都超声了，还需要处理吗
DNA都碎掉了，不明白提DNA为什么要超声

我也觉得最好不要超声破碎，超声确实会打碎基因条带。植物的可以试试。细菌和动物组织一般用蛋白酶，SDS，溶菌酶就可以达到要求。物理法一般有反复冻溶，低温碾磨等。不建议用超声波和微波。
赞一下 回复此楼
9楼2012-06-08 11:34:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

371522029

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhejiahuo1: 金币+2, 谢谢 2012-06-17 07:00:33
引用回帖:
8楼: Originally posted by 馋猫 at 2012-06-07 17:24:00
都超声了，还需要处理吗
DNA都碎掉了，不明白提DNA为什么要超声

我也觉得最好不要超声破碎，超声确实会打碎基因条带。植物的可以试试。细菌和动物组织一般用蛋白酶，SDS，溶菌酶就可以达到要求。物理法一般有反复冻溶，低温碾磨等。不建议用超声波和微波。
赞一下 回复此楼
10楼2012-06-08 12:07:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

371522029

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 馋猫 at 2012-06-07 17:24:00
都超声了，还需要处理吗
DNA都碎掉了，不明白提DNA为什么要超声

我也觉得最好不要超声破碎，超声确实会打碎基因条带。植物的可以试试。细菌和动物组织一般用蛋白酶，SDS，溶菌酶就可以达到要求。物理法一般有反复冻溶，低温碾磨等。不建议用超声波和微波。
赞一下 回复此楼
11楼2012-06-08 12:08:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangjiaojiao

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 馋猫 at 2012-06-07 17:24:00
都超声了，还需要处理吗
DNA都碎掉了，不明白提DNA为什么要超声

如果只做PCR的话是不怕超声破碎的~碎掉的也能P出来~
诸如酵母之类细胞壁比较厚的，往往SDS裂解的效果极不理想，酶破壁也要孵育比较长的时间~
赞一下 回复此楼
12楼2012-06-08 13:05:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小逍遥人

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
加了蛋白酶K效果会更加好
赞一下 回复此楼
13楼2012-09-12 16:14:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhejiahuo1 的主题更新
131/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 10:30 by xSrQNSSjcgoX
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 10:19 by xSrQNSSjcgoX
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 3/150 2026-11-15 08:18 by xSrQNSSjcgoX
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 4/200 2026-11-15 07:45 by xSrQNSSjcgoX
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 7/350 2026-11-15 03:10 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 10/500 2026-11-15 00:39 by Equinoxhua
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-14 22:04 by Equinoxhua
[考博] 27博士 +6 锦鲤送福至 2026-11-10 6/300 2026-11-14 21:23 by xupeii
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 6/300 2026-11-12 12:42 by ECLTXnJnRSXf
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 5/250 2026-11-12 11:14 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:08 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-12 09:21 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 5/250 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 17:03 by TgvkbZZl9tqB
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭