应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 急求！提DNA时,超声破碎后还用加蛋白酶K吗?
汕头大学海洋科学接受调剂
131/1返回列表
查看: 3799  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhejiahuo1

铁虫 (小有名气)

[交流] 急求！提DNA时,超声破碎后还用加蛋白酶K吗?

提DNA时,超声破碎后还用加蛋白酶K吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-06-04 17:21:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heroyl

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-06 18:41:37
应该要的吧，不知道你提的什么DNA，提之后做什么，我曾经看到过超声后用蛋白酶K消化的。
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-04 21:20:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-06 18:41:29
zhejiahuo1: 金币+1, 谢谢 2012-06-17 07:01:23
具体的提取步骤不清楚，但是个人感觉应该还需要吧。超声只是破碎细胞，而蛋白酶的一个重要作用是破坏蛋白结构致其沉淀除去。当然，如果提取过程有加入SDS的操作，蛋白酶的这个作用就可以不用考虑了。
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-04 22:50:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhejiahuo1

铁虫 (小有名气)
我是加入裂解液(含SDS)后超声破碎，提了DNA后想做巢式PCR
赞一下 回复此楼
4楼2012-06-05 05:33:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+2, Good！ 2012-06-06 18:41:47
引用回帖:
3楼: Originally posted by joan198108 at 2012-06-04 22:50:20
具体的提取步骤不清楚，但是个人感觉应该还需要吧。超声只是破碎细胞，而蛋白酶的一个重要作用是破坏蛋白结构致其沉淀除去。当然，如果提取过程有加入SDS的操作，蛋白酶的这个作用就可以不用考虑了。

蛋白酶最好还是加，能保证更充分的裂解。
超声是破碎细胞。应该属于物理性破碎？
蛋白酶属于酶消化破碎，使DNA充分释放。
赞一下 回复此楼
5楼2012-06-05 08:27:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

足下客

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也认为加入蛋白酶K之后DNA的提取效果会好很多。我每次提DNA时都会加入一定比例的蛋白酶K。
赞一下 回复此楼
6楼2012-06-05 09:10:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhejiahuo1

铁虫 (小有名气)
谢谢各位！！！
回复此楼
7楼2012-06-06 15:53:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

馋猫

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
都超声了，还需要处理吗
DNA都碎掉了，不明白提DNA为什么要超声
赞一下 回复此楼
8楼2012-06-07 17:24:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

371522029

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 馋猫 at 2012-06-07 17:24:00
都超声了，还需要处理吗
DNA都碎掉了，不明白提DNA为什么要超声

我也觉得最好不要超声破碎，超声确实会打碎基因条带。植物的可以试试。细菌和动物组织一般用蛋白酶，SDS，溶菌酶就可以达到要求。物理法一般有反复冻溶，低温碾磨等。不建议用超声波和微波。
赞一下 回复此楼
9楼2012-06-08 11:34:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

371522029

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhejiahuo1: 金币+2, 谢谢 2012-06-17 07:00:33
引用回帖:
8楼: Originally posted by 馋猫 at 2012-06-07 17:24:00
都超声了，还需要处理吗
DNA都碎掉了，不明白提DNA为什么要超声

我也觉得最好不要超声破碎，超声确实会打碎基因条带。植物的可以试试。细菌和动物组织一般用蛋白酶，SDS，溶菌酶就可以达到要求。物理法一般有反复冻溶，低温碾磨等。不建议用超声波和微波。
赞一下 回复此楼
10楼2012-06-08 12:07:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

371522029

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 馋猫 at 2012-06-07 17:24:00
都超声了，还需要处理吗
DNA都碎掉了，不明白提DNA为什么要超声

我也觉得最好不要超声破碎，超声确实会打碎基因条带。植物的可以试试。细菌和动物组织一般用蛋白酶，SDS，溶菌酶就可以达到要求。物理法一般有反复冻溶，低温碾磨等。不建议用超声波和微波。
赞一下 回复此楼
11楼2012-06-08 12:08:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangjiaojiao

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 馋猫 at 2012-06-07 17:24:00
都超声了，还需要处理吗
DNA都碎掉了，不明白提DNA为什么要超声

如果只做PCR的话是不怕超声破碎的~碎掉的也能P出来~
诸如酵母之类细胞壁比较厚的，往往SDS裂解的效果极不理想，酶破壁也要孵育比较长的时间~
赞一下 回复此楼
12楼2012-06-08 13:05:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小逍遥人

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
加了蛋白酶K效果会更加好
赞一下 回复此楼
13楼2012-09-12 16:14:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhejiahuo1 的主题更新
131/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 山东省基金2026 +7 jerry681 2026-04-08 9/450 2026-04-14 22:01 by 阿勇的篮球
[考研] 求调剂学校 +11 不会吃肉 2026-04-13 12/600 2026-04-14 19:38 by Art1977
[考研] 材料工程085601，270求调剂 +42 @ASDF1234 2026-04-08 46/2300 2026-04-14 18:12 by 逍遥三郎
[考研] 302分求调剂 +10 凡语祈愿 2026-04-08 11/550 2026-04-14 16:50 by jiangguiquan11
[考研] 复试调剂 +18 积极向上； 2026-04-10 20/1000 2026-04-14 16:11 by zs92450
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 310求调剂 +15 666真好 2026-04-11 17/850 2026-04-13 22:27 by pies112
[考研] 考研二轮调剂 +10 故人?? 2026-04-09 10/500 2026-04-13 09:55 by szhize
[考研] 322求调剂 +6 123安康 2026-04-12 13/650 2026-04-12 15:51 by 123安康
[考研] 277 数一104，学硕，求调剂 +21 瓶子PZ 2026-04-09 23/1150 2026-04-11 23:12 by labixiaoqiao
[考研] 求调剂，一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 0859，337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 11:34 by caotw2020
[考研] 0854调剂 +5 音像店听花鼓戏 2026-04-10 5/250 2026-04-11 10:49 by qingpingzhu
[考研] 机械专硕270求调剂，接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 一志愿985机械学硕380求调剂 +5 关关雎鸠10 2026-04-11 5/250 2026-04-11 10:10 by 知念。A
[考研] 311求调剂 +13 xyp想读书 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:41 by 猪会飞
[考研] 281求调剂 +11 觉得好的吧 2026-04-10 11/550 2026-04-11 09:35 by 逆水乘风
[考研] 求调剂 +5 不会飞的鱼@ 2026-04-10 5/250 2026-04-10 19:07 by chemisry
[考博] 博士自荐 +7 可可小胖 2026-04-08 7/350 2026-04-10 08:28 by kimhero
[考研] 283电子信息求调剂 +4 三石WL 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:21 by wp06
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭