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急求!提DNA时,超声破碎后还用加蛋白酶K吗?
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zhejiahuo1
铁虫
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急求!提DNA时,超声破碎后还用加蛋白酶K吗?
提DNA时,超声破碎后还用加蛋白酶K吗?
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2012-06-04 17:21:31
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金虫
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8楼
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馋猫
at 2012-06-07 17:24:00
都超声了,还需要处理吗
DNA都碎掉了,不明白提DNA为什么要超声
我也觉得最好不要超声破碎,超声确实会打碎基因条带。植物的可以试试。细菌和动物组织一般用蛋白酶,SDS,溶菌酶就可以达到要求。物理法一般有反复冻溶,低温碾磨等。不建议用超声波和微波。
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9楼
2012-06-08 11:34:28
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heroyl
木虫
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2012-06-06 18:41:37
应该要的吧,不知道你提的什么DNA,提之后做什么,我曾经看到过超声后用蛋白酶K消化的。
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2楼
2012-06-04 21:20:27
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joan198108
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2012-06-06 18:41:29
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2012-06-17 07:01:23
具体的提取步骤不清楚,但是个人感觉应该还需要吧。超声只是破碎细胞,而蛋白酶的一个重要作用是破坏蛋白结构致其沉淀除去。当然,如果提取过程有加入SDS的操作,蛋白酶的这个作用就可以不用考虑了。
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3楼
2012-06-04 22:50:20
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zhejiahuo1
铁虫
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我是加入裂解液(含SDS)后超声破碎,提了DNA后想做巢式PCR
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4楼
2012-06-05 05:33:01
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