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废哥117

银虫 (小有名气)

[交流] 关于原代取材,离心收集细胞的问题 已有3人参与

我们原代取材会将组织块剪碎后用胰酶和胶原酶消化,后离心,温度我们是设的4℃,如果用室温会不会细胞状态会好点?虽然说是低温可以抑制酶的活性,但是低温对细胞损害也很大,我纠结的是离心前我们都加了含血清的培养基来终止消化,这是否代表酶已经被抑制了呢?这种情况下是不是室温更好点?同志们有没有好的建议
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不断提高自己
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

★
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消化还是37度好些 胰酶半个小时以内 胶原酶4个小时以内  当然能短则短
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
2楼2012-05-31 22:24:28
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废哥117

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-05-31 22:24:28
消化还是37度好些 胰酶半个小时以内 胶原酶4个小时以内  当然能短则短

我的意思是离心的温度,请问你有什么好的建议吗?
不断提高自己
3楼2012-06-01 11:29:23
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

我觉得室温就可以啊
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
4楼2012-06-01 17:34:57
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暖暖暖

铁虫 (小有名气)

★
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用血清中和之后,室温25°离心就可以了,我们实验室就是这么做的 一直很好啊
Only the strong survive.
5楼2012-07-13 09:04:22
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废哥117

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 暖暖暖 at 2012-07-13 09:04:22
用血清中和之后,室温25°离心就可以了,我们实验室就是这么做的 一直很好啊

谢谢建议哦
不断提高自己
6楼2012-07-13 09:46:31
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青青筱竹

金虫 (小有名气)

★
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我们做原代培养,胰酶在37°下消化,离心就是在室温
敬畏科学
7楼2012-07-13 13:34:53
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