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[交流]
WB显影结果分子量漂移
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我是做WB的新手，电泳条件是分离胶12%，浓缩胶5%，30mA浓缩胶90min,40mA分离胶60min,250mA转膜120min，我的目的蛋白孵育抗体时一抗是1:100二抗1:2000，感觉时双条带，不知道为什么？ 内参的话一抗1:2000二抗1:2000，总是连在一起分不开，该怎么办？ 目的蛋白正确的分子量是82KD，，但是我所做出来的条带分子量对不上、偏小不到70KD，我的蛋白含有两个磷酸化的位点，会不会是这个原因？求高手指教啊。  目的蛋白 一抗1:100 二抗1:2000  内参 一抗1:2000，二抗1:2000 |
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