24小时热门版块排行榜    

查看: 2311  |  回复: 16

sunxiao1987

新虫 (初入文坛)


[交流] WB显影结果分子量漂移

我是做WB的新手,电泳条件是分离胶12%,浓缩胶5%,30mA浓缩胶90min,40mA分离胶60min,250mA转膜120min,我的目的蛋白孵育抗体时一抗是1:100二抗1:2000,感觉时双条带,不知道为什么?
内参的话一抗1:2000二抗1:2000,总是连在一起分不开,该怎么办?
目的蛋白正确的分子量是82KD,,但是我所做出来的条带分子量对不上、偏小不到70KD,我的蛋白含有两个磷酸化的位点,会不会是这个原因?求高手指教啊。

目的蛋白      一抗1:100  二抗1:2000



内参  一抗1:2000,二抗1:2000
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

userhung

禁虫 (文学泰斗)



sunxiao1987(金币+1): 谢谢参与
应该是这个原因~~~~~~~~~~~~~~
2楼2012-05-29 23:00:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aixia5

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你做的是变性胶还是非变性胶?
10楼2012-05-30 09:23:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunxiao1987

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
10楼: Originally posted by aixia5 at 2012-05-30 09:23:00
你做的是变性胶还是非变性胶?

我做的是变性凝胶
12楼2012-05-31 08:57:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caoluoyuan

金虫 (正式写手)


应该是磷酸化的问题
13楼2012-05-31 10:57:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunxiao1987

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
13楼: Originally posted by caoluoyuan at 2012-05-31 10:57:16
应该是磷酸化的问题

我查了下裂解液的说明书,说明书里谁裂解液里有加磷酸酶抑制剂,还有就是我师姐跟我用一样的裂解液一样的抗体做细胞,目的蛋白的分子量是对的,着又怎么解释呢?
14楼2012-05-31 14:50:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nakice

铁杆木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能是你转膜的时候没有注意
15楼2012-05-31 16:09:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunxiao1987

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
15楼: Originally posted by nakice at 2012-05-31 16:09:26
可能是你转膜的时候没有注意

转膜会使分子量改变?
16楼2012-06-01 10:22:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vega

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by nakice at 2012-05-31 16:09:26
可能是你转膜的时候没有注意

我的也漂了,师姐做细胞分子量正常 但我做的肝组织的分子量就下降了这是什么原因,求指教

发自小木虫Android客户端
17楼2017-03-30 20:53:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
2012-05-30 00:15   回复  
sunxiao1987(金币+1): 谢谢参与
qiaohww4楼
2012-05-30 00:21   回复  
sunxiao1987(金币+1): 谢谢参与
humengyue5楼
2012-05-30 00:22   回复  
sunxiao1987(金币+1): 谢谢参与
fengmeiyi6楼
2012-05-30 00:23   回复  
sunxiao1987(金币+1): 谢谢参与
纵览7楼
2012-05-30 00:25   回复  
sunxiao1987(金币+1): 谢谢参与
xu-gy8楼
2012-05-30 00:39   回复  
sunxiao1987(金币+1): 谢谢参与
xysi9楼
2012-05-30 00:44   回复  
sunxiao1987(金币+1): 谢谢参与
wlei17948811楼
2012-05-30 10:35   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunxiao1987 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +6 yuleib84 2026-08-18 7/350 2026-08-18 15:02 by sytp
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 8/400 2026-08-18 11:47 by gltch
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 5/250 2026-08-18 11:25 by 無關想念
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +5 基诺咪客 2026-08-17 6/300 2026-08-18 11:06 by hunter无悔
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
信息提示
请填处理意见