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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于western blot
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nieyaru

新虫 (小有名气)

[求助] 关于western blot

我的蛋白曝光以后每次都是连在一起的，基本上呈一条线了，但是我以前提的蛋白都可以，我调整了一下二抗的浓度还有有上样量，但是也没有太大改善，谁能给分析一下还有别的原因么？
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1楼 2012-05-28 00:08:12
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huijun0432

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-28 02:36:51
nieyaru: 金币+1 2012-05-29 00:14:16
你用的是红外二抗显影还是用一般的二抗+胶片显影呢？
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2楼2012-05-28 00:41:38
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nieyaru

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huijun0432 at 2012-05-28 00:41:38
你用的是红外二抗显影还是用一般的二抗+胶片显影呢？

一般+胶片显影
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3楼2012-05-28 00:48:07
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-05-28 15:47:39
nieyaru: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-05-28 23:38:50
根据你说的情况我觉得可以从下面几个方面试着尝试一下：
①减少上样蛋白量，尝试下5~10ug
②减少一二抗浓度，你稀释比例大一点
③减少曝光时间，你做一个曝光时间梯度，从几秒到十几秒甚至更长
④确定一下你的暗室是否漏光

根据我自己的经验，也就这几点了，希望能对你有帮助
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4楼2012-05-28 08:55:50
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nieyaru

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jasonwyb123 at 2012-05-28 08:55:50
根据你说的情况我觉得可以从下面几个方面试着尝试一下：
①减少上样蛋白量，尝试下5~10ug
②减少一二抗浓度，你稀释比例大一点
③减少曝光时间，你做一个曝光时间梯度，从几秒到十几秒甚至更长
④确定一下你的暗 ...

非常感谢
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5楼2012-05-28 23:40:07
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