24小时热门版块排行榜    

查看: 2632  |  回复: 10

752083371

新虫 (初入文坛)

[交流] AFLP,聚丙烯酰胺胶电泳,总是出问题 已有10人参与

为什么跑的条带是弧形的,而且总是中间显影的时候总是偏白或者条带出现断带,显影不一致,就是有的地方已经很黑了,而有的地方还不明显,上的样是没有问题的,经过琼脂糖电泳检测过。这几天总是这样,头疼了。。。。
电泳胶配方:50ml的4.5%聚丙烯酰胺胶, 250ml的过硫酸铵,70微升的TEMD.


4.5%聚丙烯酰胺胶:40%的聚丙烯酰胺胶 113ml, 10× TBE Buffer50ml,  尿素420.42g
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxiong520

银虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+5, 鼓励交流 2012-05-27 17:29:18
(1)按你的用量电泳胶配方应该是:50ml的4.5%聚丙烯酰胺胶, 250ul的过硫酸铵,50ul的TEMD.(我们实验室是按这个比例混合的);TEMED加大量会加速凝,但是凝的速度过快胶会不匀,影响跑胶的质量。APS一般现配最好。 梳子带水也会影响梳子附近胶的凝固的。在倒胶之前要好好的混匀,剧烈一点都没有关系,一定一定要混匀。
(2)显影不均匀,可能也与胶有关系,灌胶不均匀;银染时硝酸银一定要完全溶解;
2楼2012-05-26 17:43:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cxb-abc

银虫 (小有名气)

把你的图发上来看看
3楼2012-05-28 21:25:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liugs

禁虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西瓜: 金币+2, 鼓励交流! 2012-05-29 18:55:13
本帖内容被屏蔽

4楼2012-05-29 16:38:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shucanwei

木虫 (正式写手)

楼上分析得有道理!
唯以一人治天下,不以天下奉一人。
5楼2012-06-12 22:27:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wu_shiyong

银虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-15 13:51:57
胶得混匀,染色洗胶液要摇匀,胶与胶分开不能贴一起。弧型与你点样和胶有一定的关系,点样时样成滴状到加样孔的底部,不要弥散!加的时候慢点打入 不能喷!
低调稳重务实内敛---------------残
6楼2012-06-15 11:59:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

artemis1983

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
也有可能是加的电压太大,我一般是低电压过夜跑,效果比较好
7楼2012-06-15 14:05:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tlliu80

金虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
叫微笑DNA离子强度不均匀(电场不均匀),胶温度高了
8楼2013-05-04 14:50:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小涯于重庆

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问你的问题解决么?
好好学习,天天向上。
9楼2015-04-18 18:11:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzt1417

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主您好,最近我在做AFLP选择性扩增的聚丙烯酰胺电泳,但泳道颜色很深,都影响观察条带了,染色方面不是很过,就是泳道背景颜色深,跟条带块差不多了,求解答,谢谢!
10楼2015-09-04 20:59:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 752083371 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] 各位大神,目前国内有哪些比较好用的逆合成软件? 20+3 zapen 2026-09-15 7/350 2026-09-17 16:40 by 北京莱茵编辑
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:27 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:27 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:15 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 6/300 2026-09-17 13:53 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:15 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +8 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-17 11:27 by UAIjTRMuUFoj
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-17 05:16 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:02 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-17 01:50 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-16 17:27 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组|2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-16 03:14 by DgNGHc3h5tPl
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:59 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
请填处理意见