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尹海龙

铁虫 (初入文坛)

[求助] 提取的大豆RNA条带太多 都什么带!!!

各位大侠帮帮忙!这是我用Takara  RNAiso Plus 提取的大豆RNA,共7条带 marker为 Takara DL2000 ,怎么就这么多条带 ,我就迷糊了。各位大侠帮我解释一下,不胜感激。
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基因八

新虫 (初入文坛)

植物的RNA提取师姐每次提都是6条,和你上面的五条很像,就是上下各一条中间有4条。最上面的应该是28S,下面的是5S,中间的的就不知道怎么解释了,不过我每次都提3条带,也不知道那个是正解,我和师姐的方法都一样~~~~~~~
2楼2012-05-22 21:48:08
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
叶片材料的话,在18S下方会有几条带,应该是叶绿体RNA;
最下方应该是降解的RNA片断和小RNA
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
4楼2012-05-23 12:00:54
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longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-24 13:43:19
想问一下是大豆不是大豆叶子对吧?
此电泳上样量有点多,可以减少一点(OD上100-200ng即可)。
胶多大?约1.2%较好。
非常有可能是物种-样品的问题。
伟大航线....
6楼2012-05-23 17:28:07
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同意楼上香菱儿观点,应该是含有几条叶绿体RNA。以前提取水稻RNA电泳后也会出现多余三条带的情况,老师的解释就是叶绿体RNA。
7楼2012-05-23 22:34:22
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bioyujun

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
怎么我提取的一般只能看到三条带,28s,18s ,还有最底下有一坨亮亮的东西。感觉你这会不会跑电泳的过程有降解。
8楼2012-05-23 23:36:06
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xiazhiwuxie

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-24 13:43:40
带多木有事的,我提盐藻的时候也是这样,主要是叶绿体的RNA给俺倒腾出来了,但是你点样孔附近貌似有点蛋白的残留
12楼2012-05-24 09:08:23
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普通回帖

尹海龙

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 基因八 at 2012-05-22 21:48:08:
植物的RNA提取师姐每次提都是6条,和你上面的五条很像,就是上下各一条中间有4条。最上面的应该是28S,下面的是5S,中间的的就不知道怎么解释了,不过我每次都提3条带,也不知道那个是正解,我和师姐的方法都一样~~

我提了两次都这样 上一次的图比这个看着舒服点,每条带都很清晰。
3楼2012-05-22 22:23:13
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wansanlian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我提取橡胶叶片的时候,也会出现这样的情况呢.同样也是在寻求答案中~还有谁懂从微量中提取RNA的吗?
乱花渐欲迷人眼
5楼2012-05-23 15:46:56
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尹海龙

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by longrna at 2012-05-23 17:28:07:
想问一下是大豆不是大豆叶子对吧?
此电泳上样量有点多,可以减少一点(OD上100-200ng即可)。
胶多大?约1.2%较好。
非常有可能是物种-样品的问题。

胶是1.2%的上样量很高达到15ug。大豆叶片的RNA。
9楼2012-05-24 07:40:59
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这提的没有问题,说明人家试剂盒很好,你提取的也很好,所有的RNA都提取出来了。一般的试剂盒就3条带。放心往下做
10楼2012-05-24 08:22:23
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