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求助western mark 转膜不全,急!
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微露晨曦
新虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 9.5
帖子: 5
在线: 38分钟
虫号: 1827128
注册: 2012-05-20
专业: 天然药物化学
[
求助
]
求助western mark 转膜不全,急!
我用的湿转,蛋白分子量分别是220,54,36,电泳时挺好,mark都出来了,转膜的时候发现大分子量的mark没出来,我转膜的条件是300mA,电压最大。请各位给分析一下什么原因啊
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western blot 半干转膜后,发现条带个别缺失,不知道什么原因,请教各位
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1楼
2012-05-20 20:56:03
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380218013
金虫
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虫号: 1185569
注册: 2011-01-07
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流
2012-05-23 14:09:12
分子量多大都可以转上去的。我们实验室一直是全湿法转的,很好。不过最近也出现这种问题就是转膜不是很好。Maker有 但是小分子的不清楚。我建议你考马斯亮蓝染一下转膜后的胶,看胶上蛋白。在立春红染一下膜上的。我们分析很可能是缓冲液的PH原因!
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好好生活,努力赚钱
8楼
2012-05-23 13:09:13
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