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[求助]
求助western mark 转膜不全，急！
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| 我用的湿转，蛋白分子量分别是220,54,36，电泳时挺好，mark都出来了，转膜的时候发现大分子量的mark没出来，我转膜的条件是300mA,电压最大。请各位给分析一下什么原因啊 |
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atlanticwi
金虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-05-21 13:38:47
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小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-05-21 13:38:47
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嗯.................... 不知道为什么总觉得你这几个蛋白放一起转有点勉强 我以前也是听别人说湿转法很好（自己一直用半干法） 能将Marker整个都上去 但我自己用MBI的Marker从来都没有这个效果 要不就是小分子量的集中在一起（80下）要不就是大分子量的一起（120上）大分量一般明显出现在膜上时 小分量的绝对就被打穿到下滤纸.....调整电流和转膜时间都起不到好效果.......所以就放弃了 总之个人觉得调整电流没有什么用处 应该在Buffer上下功夫 有没有加甲醇 SDS之类的或者就干脆把这几种蛋白分开来转会好些吧 个人看法 若有说错请高手指点 |
2楼2012-05-20 21:20:24