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小泥巴3212

铜虫 (小有名气)

[求助] 磷酸盐-乙腈梯度洗脱 怪峰 已有2人参与

请问各位虫友:
    如图,我用0.05mol/l的磷酸盐缓冲溶液(用磷酸调pH至 7.0),初始梯度为80%的缓冲盐-20%乙腈,梯度变化到40%缓冲盐-60%乙腈,并保持17分钟,就在这17分钟会有一些杂峰出来,空运行都一样。波长是220nm.
    如果将缓冲盐换成水,则杂峰很小,这是怎么回事呢?



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xiaopretty

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也用磷酸盐和乙腈跑过,也是有一些怪峰,当时以为是梯度变换快了产生的,后来调慢了梯度还是会有。。。
7楼2014-02-27 19:19:04
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查看全部 8 个回答

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换成水的时候,峰型不好而已。缓冲盐(保持流动相一定的离子强度),有改善峰型减少拖尾的作用。
守候在风中的宁静。
2楼2012-05-17 14:57:20
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manengxuan

木虫 (小有名气)

木木

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
更改流动相比例,柱子就需要重新平衡吧,是不是是柱子平衡比较慢啊?
3楼2012-05-17 15:30:24
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
梯度出现这些峰很正常啊,只要不影响检测就可以了,影响的话,这方法就得调整。另外梯度方法进供试品之前,建议多进几针空白试剂,待系统稳定了再进样,不然想扣空白都对应不上
1234
4楼2012-05-17 16:26:51
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