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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 磷酸盐-乙腈梯度洗脱 怪峰
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小泥巴3212

铜虫 (小有名气)

[求助] 磷酸盐-乙腈梯度洗脱 怪峰 已有2人参与

请问各位虫友：
    如图，我用0.05mol/l的磷酸盐缓冲溶液（用磷酸调pH至 7.0），初始梯度为80%的缓冲盐-20%乙腈，梯度变化到40%缓冲盐-60%乙腈，并保持17分钟，就在这17分钟会有一些杂峰出来，空运行都一样。波长是220nm.
    如果将缓冲盐换成水，则杂峰很小，这是怎么回事呢？
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1楼 2012-05-17 14:32:27
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换成水的时候，峰型不好而已。缓冲盐（保持流动相一定的离子强度），有改善峰型减少拖尾的作用。
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守候在风中的宁静。
2楼2012-05-17 14:57:20
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manengxuan

木虫 (小有名气)

木木

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
更改流动相比例，柱子就需要重新平衡吧，是不是是柱子平衡比较慢啊？
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3楼2012-05-17 15:30:24
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
梯度出现这些峰很正常啊，只要不影响检测就可以了，影响的话，这方法就得调整。另外梯度方法进供试品之前，建议多进几针空白试剂，待系统稳定了再进样，不然想扣空白都对应不上
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1234
4楼2012-05-17 16:26:51
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lee10yie

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

楼主配制磷酸盐缓冲液是否用为微孔滤膜过滤，尽量使用GR级的磷酸盐和超纯水，国产的AR级试剂质量有时不太好，而且220nm的波长算比较短的，基线上有些小杂峰也是有可能的。
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5楼2013-06-19 18:49:10
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lee10yie

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

液相流动相中缓冲盐的浓度不宜过高，一般不超过20mM，这样色谱柱的寿命比较长。
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6楼2013-06-19 18:52:45
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xiaopretty

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也用磷酸盐和乙腈跑过，也是有一些怪峰，当时以为是梯度变换快了产生的，后来调慢了梯度还是会有。。。
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7楼2014-02-27 19:19:04
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hanbing412

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

不知楼主有没有解决这个问题，我目前也遇到了同样的问题，试了很多种方法都没解决，求助中。。。
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8楼2015-07-13 22:12:32
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