应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 养细胞的高手帮我分析一下
111/2返回列表12下一页
查看: 1984  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yuanalice

银虫 (小有名气)

[求助] 养细胞的高手帮我分析一下

细胞里出现了小黑点，貌似不影响细胞的生长，传代也没什么问题，但是做了两次细胞转染，都没什么阳性的克隆细胞，又仔细观察了细胞，好像细胞质里有什么东西，细胞变黑了，有很多小黑点，细胞外也有小黑点。究竟什么原因呀？明年就要毕业了，要转染出的蛋白继续试验呢，愁呀，希望养细胞的高手给我点建议，多谢啦！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

昆虫细胞表达系统

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-05-17 08:40:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

世外清风

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细胞状态不行了，很有可能是细胞状态不行，死细胞多，细胞碎片就多，我们习惯把它叫做胶原虫，其实应该是细胞碎片。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2012-05-18 08:15:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

沈郁安

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yuanalice: 金币+6, ★★★很有帮助 2012-05-17 09:39:16
（1）细胞支原体污染，这个我以前遇到过，无法解决
（2）细胞代谢物，建议在操作时多用PBS洗几次，培养基用滤器过滤，把细胞多传几个瓶子，减少密度试试。
赞一下 回复此楼
跌倒再爬起，成功属于一步一个脚印踏踏实实、全面了解信息的人
2楼2012-05-17 09:27:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanalice

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
silicare: 金币+1, 应助指数+1 2012-05-19 10:16:59
引用回帖:
2楼: Originally posted by 沈郁安 at 2012-05-17 09:27:01:
（1）细胞支原体污染，这个我以前遇到过，无法解决
（2）细胞代谢物，建议在操作时多用PBS洗几次，培养基用滤器过滤，把细胞多传几个瓶子，减少密度试试。

支原体污染在显微镜下是不是看不见呀，培养基用滤器过滤，是指加过血清的培养基吗？多谢啦！
赞一下 回复此楼
3楼2012-05-17 09:41:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ciqql

新虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
amisking: 金币+5, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-05-17 20:23:06
是细胞培养中很容易出现，但是又容易被很多学生忽略的一个问题，根据你描述的现象，很可能是支原体、衣原体之类的污染，过滤培养液的膜，孔径太大，无法有效去除支原体这么小的东西，建议以后实验中，对血清的灭活做的更仔细的，
这种污染最讨厌，最好的办法是全部扔掉，重新复苏，万一再没有细胞了，传代、稀释都勤快点，让支原体处于一个较低的水平，做完试验后，立刻扔掉所有细胞，这种情况有时会影响好几代研究生
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-17 16:32:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水一315

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yqbter: 金币+1, 很好的回答！ 2012-05-18 12:54:00
内容已删除
赞一下 回复此楼
What ever is worth doing is worth doing well.
5楼2012-05-18 01:09:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dennis198721

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很可能是支原体污染，对于这个没什么办法，只能更换了
赞一下 回复此楼
7楼2012-05-18 08:47:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greenspringmi

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有可能是黑胶虫污染，细胞只能丢弃了，培养箱也需要彻底消毒
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-18 14:24:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沈郁安

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by yuanalice at 2012-05-17 09:41:13:
支原体污染在显微镜下是不是看不见呀，培养基用滤器过滤，是指加过血清的培养基吗？多谢啦！

是加了血清的培养基，在换液之前过滤，滤器的孔径选小一点。
赞一下 回复此楼
跌倒再爬起，成功属于一步一个脚印踏踏实实、全面了解信息的人
9楼2012-05-18 14:54:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglei512

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 沈郁安 at 2012-05-18 14:54:44:
是加了血清的培养基，在换液之前过滤，滤器的孔径选小一点。

我们实验室也遇到过，小黑点在显微镜下会做类似布朗运动，刚开始只有几个，随着传代次数增加，小黑点会布满整个胞质。有人说是血清里面的东西，一些配置高的显微镜才可以看到。有人说是黑胶虫，细胞死亡速度很快，建议你把所有能扔的都扔了，好好灭菌打扫细胞室。重新采样，再养吧。用啥抗生素都没用，早扔早托生。
赞一下 回复此楼
10楼2012-05-18 17:30:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuanalice 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 07:41 by OEbVnUOu01ol
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +4 简单化xn 2026-08-22 8/400 2026-08-23 07:20 by ilovexiaobin
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 04:04 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭