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[求助]
求助各位大侠！！GUS染色总是染不出好的效果怎么办
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最近在做大豆GUS瞬时表达率方面的试验，可是GUS染色效果总是不理想，染上颜色的外植体数量非常非常少，而且也只是零零星星的蓝点，要不然就是染色的位置不对~~这是怎么一回事啊，菌株是不会有问题的啊 这是我GUS染色液的配方： A 0.2M P.Buffer PH 7.0 KH2PO4 (MW 136.09) 27.22g/L KHPO4 (MW 174.20) 34.84g/L 混合 PH 7.0 B 水 C 10% Tri tonx-100 10ml Tri nx-100用ddH2O 定容至100ml D 38.8 Mm X-glu-tock solution 49.4 ml二甲基甲酰胺 (DMF)溶解1g (100mg) X-glu分装 -20℃保存 E 50mm K3Fe(CN)6 (MT 329.26) 16.464g/L ddH2O F 50mm K4 Fe(CN)6 (MT 368.358, 18.179g/L) G 100mM EDTA钠盐 比例是1ml的染色液里，P.Buffer500ul，Tri tonx-100 K3Fe(CN)6 K4 Fe(CN)6 各加10ul，EDTA钠盐 100ul，X-glu 25.78ul，剩下的用ddH2O补齐，将外植体用染色液浸泡并37℃水浴，后用70%酒精脱色~~ 就是这样，可是效果总是不理想，有没有哪位帮我分析下原因啊 谢谢！！ |
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2楼2012-09-07 21:15:40
xiemin217
木虫 (正式写手)
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