24小时热门版块排行榜    

查看: 1982  |  回复: 9

暖暖暖

铁虫 (小有名气)

[求助] 氯霉素抗性的质粒转入氯霉素抗性的宿主菌,请问如何鉴定是否成功转入!?

如题~氯霉素抗性的质粒转入氯霉素抗性的宿主菌,请问如何鉴定是否成功转入!?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

Only the strong survive.
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)

感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 应助指数-1 2012-05-20 18:34:23
问题是你转进去了,如何确保不丢失呢?
致良知
2楼2012-05-13 22:18:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没有别的标记了么?摇菌提质粒酶切看看
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
3楼2012-05-13 22:28:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈帅印

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
摇菌扩大培养,先做pcr,再提质粒酶切测序
4楼2012-05-14 09:47:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Rubisco580

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by quiller2000 at 2012-05-13 22:18:33:
问题是你转进去了,如何确保不丢失呢?

没错,如何保证呢。
还是换个抗性吧或者换个宿主吧。
5楼2012-05-14 10:32:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiao7270

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
设计特异性引物做PCR进行验证,提质粒进行酶切验证。为什么不用带别的抗性的质粒?
6楼2012-05-16 11:33:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-16 16:14:47
你这个菌本身就有抗性的话,很有可能会存在没有选择性压力存在而导致质粒丢失,还有一个方法,你可以先检测一下本身宿主菌抗氯霉素的范围,然后如果是转进质粒的话,应该是能抗更高的抗生素
7楼2012-05-16 15:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暖暖暖

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by hyacinth326 at 2012-05-16 15:24:12:
你这个菌本身就有抗性的话,很有可能会存在没有选择性压力存在而导致质粒丢失,还有一个方法,你可以先检测一下本身宿主菌抗氯霉素的范围,然后如果是转进质粒的话,应该是能抗更高的抗生素

谢谢兄台相助,我还是换个宿主菌吧,省得后续出什么问题。
Only the strong survive.
8楼2012-05-20 10:27:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暖暖暖

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by xiao7270 at 2012-05-16 11:33:28:
设计特异性引物做PCR进行验证,提质粒进行酶切验证。为什么不用带别的抗性的质粒?

谢谢相助!这个质粒是分子伴侣的一个质粒,本身带有氯霉素抗性,我之前用一个有氯霉素抗性的宿主菌表达出蛋白了,只是都是包涵体存在,想通过转入这个分子伴侣质粒看看能否提高可溶性的。
Only the strong survive.
9楼2012-05-20 10:30:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暖暖暖

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by quiller2000 at 2012-05-13 22:18:33:
问题是你转进去了,如何确保不丢失呢?

请问一下,为什么会出现丢失的情况啊?我刚开始接触,望指教!
Only the strong survive.
10楼2012-05-20 10:32:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 暖暖暖 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:51 by jCd0dEvKHShX
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:50 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +14 晴天加油 2026-08-26 15/750 2026-08-29 11:06 by biily
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 9/450 2026-08-29 09:59 by jklily
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 05:45 by gy1nBQXYQJqL
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
请填处理意见